【摘 要】
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本试验旨在通过体外法研究竹叶黄酮(BLF)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)抗氧化及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路中关键基因表达的影响.采用单因素试验设计,对照组不添加BLF,试验组分别添加不同浓度(0.5、1.0、5.0、10.0、20.0、60.0、100.0μg/mL)BLF,处理BMECs 3、6、12、24和48 h后,应用细胞增殖试剂盒(CCK?8)法检测BMECs的活性,应用乳酸脱氢酶(LDH)法检测BLF对BMECs的毒性,每次试验平行复孔6个,重复试验3次.分别应用流式细胞仪和
【机 构】
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北京农学院动物科学技术学院,奶牛营养学北京市重点实验室,北京 102206;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193
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本试验旨在通过体外法研究竹叶黄酮(BLF)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)抗氧化及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路中关键基因表达的影响.采用单因素试验设计,对照组不添加BLF,试验组分别添加不同浓度(0.5、1.0、5.0、10.0、20.0、60.0、100.0μg/mL)BLF,处理BMECs 3、6、12、24和48 h后,应用细胞增殖试剂盒(CCK?8)法检测BMECs的活性,应用乳酸脱氢酶(LDH)法检测BLF对BMECs的毒性,每次试验平行复孔6个,重复试验3次.分别应用流式细胞仪和试剂盒法检测BLF对BMECs抗氧化指标的影响,并应用实时荧光定量PCR法检测凋亡相关基因以及mTOR信号通路中相关基因表达量的变化.结果表明:1)BLF对BMECs活性适宜作用浓度为1.0、5.0、10.0μg/mL,最佳作用时间为12 h,且此浓度的BLF对BMECs无毒性作用.2)流式细胞仪检测结果表明,与对照组相比,5.0、10.0μg/mL的BLF极显著降低了BMECs的早期凋亡率和晩期凋亡/坏死率(P<0.01),BLF极显著降低了BMECs的总凋亡率(P<0.01).3)与对照组相比,5.0μg/mL的BLF极显著降低了细胞内活性氧(ROS)的生成和线粒体膜电位(MMP)水平(P<0.01).4)与对照组相比,添加BLF可极显著升高BMECs的总超氧化物歧化酶(T?SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH?Px)(P<0.01)活性极显著降低丙二醛(MDA)的含量(P<0.01).5)实时荧光定量PCR的结果表明,与对照组相比,添加5.0μg/mL的BLF显著降低B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)的基因相对表达量(P<0.05);BLF可极显著提高B淋巴细胞瘤/白血病-2(Bcl?2)的基因相对表达量(P<0.01),极显著降低Bax/Bcl?2的比值(P<0.01);添加5.0和10.0μg/mL的BLF显著降低环氧合酶-2(COX?2)基因相对表达量(P<0.05),极显著降低半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase?3)基因相对表达量(P<0.01),极显著提高真核翻译起始因子4E结合蛋白1(EIF?4EBP1)基因相对表达量(P<0.01);此外,与对照组相比,BLF可极显著提高BMECs中mTOR信号通路关键调控基因mTOR、核糖体p70s6(S6K1)和细胞周期素D1(Cyclin D1)基因相对表达量(P<0.01),极显著提高β-酪蛋白(β?casein)基因相对表达量(P<0.01).综上所述,BLF可促进BMECs的活性,减少ROS的积累和MMP水平;BLF可显著提高BMECs的抗氧化能力,降低凋亡相关基因的表达,通过mTOR信号通路转导,从而影响乳蛋白的合成.
其他文献
本试验旨在研究黄羽肉鸡早期发育过程中肠道结构和功能发育的变化,以及在饲粮中添加大麦虫粉对其肠道结构和功能发育的影响.选取90只1日龄健康的黄羽肉鸡,随机分为3组,每组6个重复,每个重复5只鸡.对照组饲喂基础饲粮,抗生素组饲喂在基础饲粮基础上添加300 g/t 15％金霉素和40 g/t 50％维吉尼亚霉素的饲粮,大麦虫粉组饲喂在基础饲粮中添加3％大麦虫粉的饲粮.3组饲粮的营养水平相同,试验期7 d.结果表明:1)1～7日龄,随着日龄的增长,黄羽肉鸡小肠总长度显著增加(P<0.05),回肠相对长度显著增加(
本试验旨在探讨香芹酚和百里香酚对绵羊养分表观消化率、瘤胃发酵特性及纤维降解菌数量的影响.选取9只健康装有永久瘤胃瘘管的小尾寒羊公羊,采用3×3拉丁方设计,预试期5 d,正试期15 d.对照组(CON)饲喂基础饲粮,试验1组(T1组)在基础饲粮精料中添加香芹酚(2 g/d),试验2组(T2组)在基础饲粮精料中添加百里香酚(2 g/d).从正试期第10天开始,连续5d采用全收粪法进行消化代谢试验,测定养分表观消化率;正试期最后1天在采食前(0 h)以及采食后1、3、5、7 h采集瘤胃液,测定发酵参数和纤维降解
本试验旨在通过混合青贮的方式,探究甘蔗尾或甘蔗与桑叶混合青贮对其青贮品质的影响,为改善广西地区的非常规饲料资源利用率和混合青贮饲料的实际应用提供科学依据和技术支撑.试验1:甘蔗尾与桑叶混合青贮;试验2:甘蔗与桑叶混合青贮.2种青贮原料的混合比例分别为100:0、75:25、50:50、25:75、0:100.试验1结果表明:1)与甘蔗尾单独青贮相比,甘蔗尾与桑叶混合青贮显著增加了混合青贮饲料的粗蛋白质、乳酸、乙酸和丙酸含量(P0.05),但能降低其有氧暴露后pH和酵母菌的增长速率.因此,桑叶与甘蔗尾混合青
为研究饲料中维生素K3含量对大口黑鲈消化能力、血清代谢指标、肌肉氨基酸和脂肪酸组成的影响,在基础饲料中分别添加不同水平的维生素K3,配制成维生素K3含量分别为0.78(K0组)、5.80(K5组)、10.82(K10组)、15.84(K15组)和20.85 mg/kg(K20组)的5种试验饲料,对初均重为(12.96±0.07)g健康大口黑鲈幼鱼进行为期8周的饲养试验.结果表明:添加维生素K3的各组胃和肠道的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性均显著低于K0组(P0.05),但是随着饲料中维生素K3含量的增加,必需
本试验旨在通过混合青贮的方式,探究甘蔗尾或甘蔗与构树叶混合青贮对其发酵品质的影响,为改善广西地区的非常规饲料资源利用率和混合青贮饲料的实际应用提供科学依据和技术支撑.试验1:甘蔗尾与构树叶混合青贮;试验2:甘蔗与构树叶混合青贮.甘蔗尾或甘蔗与构树叶的混合比例分别为100:0、75:25、50:50、25:75、0:100.试验1结果表明:1)与甘蔗尾单独青贮相比,甘蔗尾与构树叶混合青贮显著增加了混合青贮饲料的粗蛋白质、乙酸含量(P<0.05),显著提高了有氧暴露后乙酸和丙酸的含量(P<0.05),并显著降
本试验旨在研究胆固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP?1)基因对高寒草原饲养西门塔尔牛血液脂肪酸组成的影响,为其今后繁育中优良遗传基因的保留提供基础数据.试验使用血液样品来自高寒草原饲养的30头18月龄澳洲进口纯种西门塔尔公牛.利用气相色谱-质谱联用法测定血液脂肪酸组成和含量,实时荧光定量PCR测定血液SREBP?1基因相对表达量,并对SREBP?1基因进行测序.结果表明:高寒草原饲养的纯种西门塔尔牛血液共测得36种脂肪酸,其中含量较高的是棕榈酸(12.57％)、硬脂酸(21.76％)、油酸(22.11％
本试验旨在优化复合益生菌发酵豆粕的工艺参数,并研究发酵豆粕(FSBM)部分替代大黄鱼饲料中的鱼粉对其生长性能、消化性能、非特异性免疫功能和抗氧化性能的影响.首先采用正交试验优化豆粕发酵工艺,然后用发酵豆粕替代饲料中部分鱼粉进行大黄鱼养殖试验.以270尾初始体重为(22.81±9.16)g的大黄鱼为试验对象,随机分为3组,每组3个重复,每个重复30尾鱼.对照组(FM组)饲喂鱼粉含量为25％的基础饲料,2个试验组分别饲喂以发酵豆粕替代基础饲料中30％(FSBM?30组)和50％鱼粉(FSBM?50组)的试验饲
本试验旨在研究饲粮中联合添加牛至精油和抗菌肽对生长肉兔生长性能和肠道屏障的影响.试验选用324只初始体重相近的38日龄健康断奶肉兔,随机分为2组,每组9个重复,每个重复18只兔.对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中联合添加0.08％的牛至精油和0.15％的抗菌肽.试验期为30 d.结果表明:与对照组相比,试验组肉兔的平均日增重显著增加(P<0.05),料重比和腹泻率显著降低(P<0.05);试验组空肠和回肠的绒毛高度及回肠的绒毛高度/隐窝深度显著增加(P<0.05);饲粮联合添加牛至精油和抗菌肽显著增加
本研究以竹叶黄酮(BLF)为添加剂,探究其对热应激诱导奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)损伤的保护作用.将不添加BLF、37℃处理的BMECs设为对照组,不添加BLF、42℃处理的BMECs设为热应激组,以添加不同浓度(1、5、10μg/mL)的BLF、42℃处理的BMECs设为试验组,每组3个重复.应用乳酸脱氢酶(LDH)法检测BLF对热应激诱导BMECs氧化损伤的影响以及流式细胞仪和试剂盒法检测BLF对热应激诱导BMECs氧化损伤后抗氧化指标的影响,并应用实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因以及核因子红细胞
本试验对野生达乌尔黄鼠诱导冬眠期间肠道菌群的结构和功能变化进行了研究,旨在探究诱导冬眠期间野生达乌尔黄鼠肠道菌群如何发挥其功能以帮助机体维持正常的生理功能,为今后进一步研究其作用机制提供依据.适应性喂养14 d后,将8只野生达乌尔黄鼠随机分为2组,对照组饲养于室温,诱导冬眠组饲养于4℃无光照环境,2组均饲喂标准鼠饲粮,自由饮水.诱导冬眠组诱导10 d后,取盲肠内容物进行16S rRNA测序并进行生物信息学分析.结果显示:诱导冬眠组Shannon指数显著高于对照组(P<0.05),表明诱导冬眠组野生达乌尔黄