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摘 要: 探讨黄柳菇多糖对力竭运动大鼠应激性溃疡的预防效果。方法:30只SD 大鼠随机分为安静 对照组、力竭运动组和力竭运动服药组。共6周训练,第7周第1 d进行力竭运动后即刻,观察 各组大鼠胃溃疡指数,胃组织结构、及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)、丙二醛(MDA)和一氧化氮合酶(NOS)、内皮素(ET)等指标的变化。结果:力竭 运动后大鼠发生应激性溃疡,力竭运动组与安静组相比,各项抗氧化酶的活性明显下降,丙 二醛含量显著增加,溃疡指数升高,力竭运动服药组溃疡指数、丙二醛含量较力竭运动组下 降,抗氧化酶的活性较力竭运动组有显著提高。结论:黄柳菇多糖有很好的抗氧化作用,并 能缓解剧烈运动中胃粘膜的缺血状态,起到保护胃粘膜的作用,从而有效预防应激性溃疡的 发生。
关键词:黄柳菇多糖;力竭运动;应激性溃疡;预防效果
中图分类号:G804.5文献标识码:A文章编号 :1007-3612(2010)01-0059-03
An Experimental Research of Pholiota Adiposa Polysaccharide on E xhaustive Exercise
Rats’ Stress Ulcer Prevention
WU Hequn1, WANG Yong1, LIU Gang2, SHANGGUAN Zhoujian3
(1.Department of Physical Education, Sanming College, Sanming 3 65004, Fujian China; 2. Beijing Sport University,
Beijing 100084, China;3. Sanming Institute of Fungus,Sanming 365000, Fujian China)
Abstract: The research is to investigate pholiota adiposa polysaccharide to exha ustive exercise rats’ stress ulcer prevention. Methods: 30 rats are randomly di vided into three groups: quiet control group, exhaustive exercise group and exha ustive exercise medication group. Training continuing for 6 weeks,The first sev en weeks for the 1st day after exhaustive exercise ,to observe the ulcer index of rats、the organizational structure of the stomac h, SOD, GSHPx, MDA, NOS, ET changes are indicators. Occurred after exhaustivee xercise stress ulcer in rats, the activity of antioxidant enzymes decreases, MDAcontent increases significantly higher ulcer index, but the other two groups ar e different. Exhaustive exercise index ulcer medication group, MDA content is de creased, the activity of antioxidant enzymes than the exhaustive exercise groupimproved significantly. Conclusion: Pholiota adiposa polysaccharide has very goo d antioxidation, and strenuous exercise can alleviate the ischemic state of ga s tric mucosa, playing a role in gastric mucosal protection in order to effectivel y prevent the occurrence of stress ulcer.
Key words: pholiota adiposa polysaccharide; exhaustive exercise; stressulcer; preventive effect
应激性溃疡是指机体在各类应激状态下所引起的一种急性胃粘膜表浅损伤,表现为胃粘膜出 血、糜烂,好发部位在胃体和胃底[1]。运动可引起机体各组织器官代谢发生改变 ,力竭运动作为一种强烈的应激原可导致运动应激性胃溃疡[2]。黄柳菇[Pholiot a adipasa (Fr)Quel]属于真菌门(Eumycota)的一种食药兼用真菌。该菌肉质滑嫩,香味浓 郁,营养丰富,含有丰富的多糖、粗蛋白、氨基酸、维生素、微量元素及总黄酮类化合物等 营养物质[3]。有研究表明黄柳菇多糖是良好的抗氧化剂[4,5]和免疫增强 剂[6],可通过抗氧化损伤、改善细胞内环境、保护生物膜,预防胃肠道溃疡和延 缓肌肉疲劳[7,8]。本实验选用大鼠力竭运动所致的运动应激性溃疡为模型,观察黄 柳菇多糖对运动大鼠应激性溃疡的作用效果,为其应用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物与分组选用SD雄性健康大鼠30只,体重(150±20)g。大鼠饲养温度:(22±1)℃,湿度:59%~61% ,每天光照与黑暗时间各为12 h。所用笼具、饲料、垫料、饮水均高压灭菌(15磅、20 min) 。将大鼠随机分为安静对照组(A)、力竭运动组(B)和力竭运动服药组(C),实验期间,动物 自由摄食、饮水。
1.1.2 黄柳菇多糖的提取将新鲜黄柳菇(由福建省三明真菌研究所选育)依次用自来水、蒸馏水清洗,吸干表面 水分,65℃烘干。烘干后放入高速捣碎机中,制成粉末样品,放入烧杯中,加入20倍分量蒸 馏水,在80℃恒温水浴2 h,然后4 000 r/min离心30 min,取上清液。再用蒸馏水清洗滤渣 数次,离心并合并上清液。黄柳菇粗多糖经纯化(蛋白质用Sevage法除去,单糖、低聚糖等 干扰成分则用乙醇进行沉淀处理)后的沉淀物于65℃的干燥箱中烘干,得黄柳菇多糖。
1.1.3 用药方法服药组每天灌胃2 mL剂量为200 mg/kg体重的黄柳菇多糖,安静对照组和力竭训练组灌 胃同体积的
1.2 方法
1.2.1 大鼠训练模型大鼠进行力竭性跑台运动:运动组以15 m/min,15 min/d进行5 d的适应性运动,休息 两天后进行正式训练期。全程训练分2个阶段:基础训练阶段(4周)和大强度训练阶段(2 周),每周训练5d,灌胃给药30 min后开始训练。基础训练期间,跑速每周递增,分别为15 m /min,19 m/min,23 m/min,27 m/min,(运动强度根据Bedford的最大摄氧量确定,当运 动强度超过90%(速度≧27.2 m/min)最大摄氧量时为大强度)共四周;大强度训练期间每 天训练30 min,速度分别为31 m/min,35 m/min,共二周。
![](https://www.soolun.com/img/pic.php?url=http://img.resource.qikan.cn/qkimages/btxb/btxb201001/btxb20100117-1-l.jpg)
1.2.2 取材第7周第1d力竭运动后(连续施加机械刺激大鼠不能继续跑动、下跑台 后腹部触地)取胃, 胃取出后,置于冰生理盐水中洗净血液,沿大弯侧剪开后,展平,计算溃 疡指数(按Guth[9]标准计算溃疡数,按溃疡面积大小给予记分:斑点状糜烂为1,糜烂<1 mm,1≤<2 mm为3分,2≤<3 mm为4分,依次类推,损伤宽度超过1 mm,分数加倍。 );然后以生理盐水低温匀浆,制备5%的匀浆液,3 500 r/min离心10 min,取上清液,在1 ~4℃的冰箱保存,待测。
1.2.3 指标测定 超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)、丙二醛(MDA)和一氧化氮合酶(NOS)含量测定,全部使用南京建成生物制剂 公司生产的试剂盒,严格按照说明操作;内皮素(ET)试剂盒购自北京科美东雅生物技术有 限公司,用放射免疫分析法测定。
1.2.4 胃组织光镜制样胃组织经过取材→固定,中性甲醛固定→脱水,二甲苯透明→包埋,采用石蜡包埋→切片, 切片机沿腺胃进行切片→常规粘片、展片、脱腊,采用HE染色。
1.2.5 统计学处理 所有数据采用SPSS12.0软件进行处理。实验 结果以平均数±标准差(X±SD)表示,数据进行组间t-检验,显著性差异选择P<0.05和P< 0.01水平。
2 结 果
2.1 黄柳菇多糖对大鼠胃黏膜溃疡指数(UI)的影响
由表2可见,力竭训练组大鼠出现胃溃疡,溃疡指数为8.62±1.71,与安静对照组相比 有极显著性差异(P<0.01),训练加药组(B)大鼠出现轻微的胃溃疡,溃疡指数为2.97±1 .13,与安静组相比较有显著性差异(P<0.05)。
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2.2 黄柳菇多糖对大鼠血清中SOD、GSH-PX和MDA的影响 表3 结果显示,力竭训练组大鼠血清抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性均高于安静对照组,有著性差 异(P<0.05)。训练服药组血清抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性均高于力竭训练组,有显著 性差异(P<0.05)。力竭训练组MDA含量与安静对照组有极显著性差异(P<0.01) ,训练服药组血清的MDA低于力竭训练组,有显著性差异(P<0.05)。
![](https://www.soolun.com/img/pic.php?url=http://img.resource.qikan.cn/qkimages/btxb/btxb201001/btxb20100117-3-l.jpg)
2.3 黄柳菇多糖对大鼠胃组织中SOD、GSH-PX和MDA的影响
表4结果显示,力竭训练组大鼠胃组织抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性均高于安静对照组,有著 性差异(P<0.05)。训练服药组胃组织抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性均高于力竭训练组, 分别有显著性差异(P<0.05)和极显著性差异(P<0.01)。力竭训练组MDA含量与安静 对照组有显著性差异(P<0.05),训练服药组血清的MDA低于力竭训练组,有显著性差 异(P<0.05)。
2.4 胃组织光镜观察
2.5 黄柳菇多糖对大鼠胃组织中一氧化氮合酶(NOS)、内皮素(ET)的影响 实验结果表5可见,力竭训练组胃窦组织中的NOS和 ET活性均高于安静组 ,分别有显著性差异(P<0.05)与极显著性差异(P<0.01);力竭服药组分别与安静 组相比存在显著性差异(P<0.05)。
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3 分析与讨论
3.1 黄柳菇多糖对力竭运动大鼠胃组织自由基的影响急性运动和力竭运动都可以导致内源性自由基增多,脂质过氧化反应增强,构成对细胞膜 系统的损害[10]。运动后体内的自由基、脂质过氧化反应增强的机制主要是由于线 粒体的氧化磷酸化、细胞内钙的再聚集和黄嘌呤氧化酶途径产生了大量的自由基[11] ,以及机体内 源性的抗氧化防御系统不能有效地清除自由基。自由基将在体内大量积累,影响运动时细胞 的正常生理功能,表现在引起膜流动性下降的同时伴随通透性改变,离子调节失衡,膜电位 改变,动作电位受到影响,运动能力下降,产生运动性疲劳。而且自由基脂质过氧化反应参 与许多的病理生理过程,如衰老、肿瘤、缺血再灌注、细胞增殖以及放射性损伤等。
![](https://www.soolun.com/img/pic.php?url=http://img.resource.qikan.cn/qkimages/btxb/btxb201001/btxb20100117-5-l.jpg)
本研究发现力竭运动过程中胃组织产生大量氧自由基,超过了其清除能力,导致胃组织 脂质过氧化水平升高,造成膜系统损伤,氧自由基使含-SH的酶如GSH、Na+-K+-AT Pase 等失活,生理内环境遭到破坏,导致细胞死亡或调亡,自由基损伤是引发运动应激性溃疡的 重要原因之一。黄柳菇多糖具有很好的抗氧化活性、清除自由基和增强免疫力的功效,能提 高抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化反应,起到保护生物膜和延缓疲劳的作用。本研究通过测 定力竭运动服药组运动后胃组织中抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性和MDA的含量,结果显示抗氧 化酶SOD、GSH-Px的活性都有显著提高,MDA的含量显著下降,表明力竭运动大鼠胃组织中自 由基生成增多,清除自由基的酶活性下降,服用黄柳菇多糖有利于消除胃组织中自由基,增 强抗氧化能力。
3.2 黄柳菇多糖对大鼠胃组织中一氧化氮合酶(NOS)、内皮素(ET)的影响NO是在NOS催化下产生的,属于胃粘膜防御因子,NOS是NO合成的关键酶,其活性直接影 响NO的合成。一氧化氮(NO)及内皮素(ET)分别作为血管舒张和收缩因子,直接影响溃疡周围 血流,影响细胞氧合作用及粘膜防御能力,NO与ET对调节胃肠道粘膜血流量,维持粘膜完整 性和微血管屏障的正常功能有重要作用。当胃粘膜受损时,NO通过改善其微循环,增加局部 供血供氧起到保护作用。ET是一种重要的致溃疡因子,是已知最强的有收缩作用的血管活性 物质。可使粘膜血管和微血管持续强烈的收缩,使胃粘膜血流量明显减少,导致粘膜损伤。
![](https://www.soolun.com/img/pic.php?url=http://img.resource.qikan.cn/qkimages/btxb/btxb201001/btxb20100117-6-l.jpg)
本研究发现,力竭运动组NOS的活性高于安静对照组,有显著性差异,ET活性高于安静 对照组,有极显著性差异,表明在力竭运动时扩血管因子与缩血管因子失衡,特别是缩血管 因子的升高,使胃粘膜血流量明显减少,导致溃疡的发生。而力竭运动服药组NOS的活性明 显高于力竭运动组,ET的活性明显低于力竭运动组,表明黄柳菇多糖能改善胃粘膜微循环, 增加供血供氧起到保护作用。
3.3 黄柳菇多糖对大鼠胃黏膜溃疡指数(UI)的影响胃粘膜具有丰富的毛细血管,胃粘膜血管张力的最适调整和胃粘膜微循环的良好血流对 于保护胃粘膜屏障、维持胃粘膜完整性具有重要作用[12]。充足的胃粘膜血流量一 是随时带 走返流到粘膜内的H+以维持粘膜内正常的PH值;二是保证粘膜细胞迅速地新陈代谢而不断提 供丰富的氧和营养物质,以维持正常的细胞功能。胃粘膜损伤的另一个重要原因是内源性扩 血管因子和缩血管因子失衡、胃粘膜微循环调节障碍、胃粘膜血流减少所致[13]。 应激性溃 疡是机体在应激状态下,出现的一种以胃粘膜糜烂或浅表溃疡为特点的急性胃粘膜病变,损 伤多位于粘膜皱襞表面,亦可位于皱襞基底部或皱襞毗邻面,呈点状或线状出血坏死[ 14]。
力竭运动作为一种应激源,可引起大鼠应激性溃疡。溃疡指数反映胃粘膜损伤的程度,如 发生胃溃疡,溃疡指数将发生改变,且溃疡指数大小与胃粘膜损伤程度呈现出正变关系。由于 剧烈运动期间,神经、体液调节导致血液的重新分配,胃肠血流量急骤下降,并随运动的持 续和强度的递增表现得更加明显,造成了运动性胃缺血。而胃粘膜缺血是形成运动应激性溃 疡的最根本条件[15],也是最主要的病理生理过程。本研究发现力竭运动造成胃粘 膜组织出 现严重的溃疡现象,与安静组相比有极显著性差异,溃疡指数8.62±1.71,其原因可能为力 竭运动导致自由基的增多与堆积,脂质过氧化水平升高和胃粘膜血流量减少。而服用黄柳菇 多糖对胃粘膜溃疡有良好的改善,溃疡指数2.97±1.13,其机制与黄柳菇多糖改善了胃粘膜 的保护作用有关。
4 结 论
1) 力竭运动可导致运动应激性溃疡,产生机制可能是自由基损伤和扩血管因子与缩血管因 子失衡所致。
2) 黄柳菇多糖有很好的清除自由基的作用,并可改善胃粘膜的局部血流量,缓解剧烈运动 中胃粘膜的缺血状态,从而减轻在运动应激状态下胃粘膜的损伤。
参考文献:
[1] 张一楚.应激性溃疡[J].上海医学,1999,22(8):454-455.
[2] 林应兴,田景芝,童金华.黄伞的研究进展[J].亚热带农业研究,2009,5(2):90-93 .
[3] 李爽,李燕舞,阿拉木斯.力竭性运动对大鼠胃组织损伤的研究[J].成都体育学院 学报,2008,34(1):81-83.
[4] 黄清荣,辛晓林,钟旭生,等.黄伞菌丝体多糖提取及其抗疲劳活性的研究[J].食品 研究与开发,2005,26(6):6-9.
[5] 吉叶梅,胡秀清,宫春宇,等.黄伞胞外多糖抗自由基作用的研究[J].生物技术,20 07,17(2):29-31.
[6] 史亚丽,蔡德华,王晓洁,等.大负荷运动训练对小鼠免疫功能的影响及黄伞多糖干预 作用研究[J].体育科学,2009,29(6):67-72.
[7] 黄年来.中国食用菌百科[M].北京:中国农业出版社,1993:142.
[8] 张光亚.云南食用菌[M].昆明:云南人民出版社,1984:175-176.
[9] Guth, P,H,et al.Topical aspirin plus Hcl gastric lesion in the rat cytopro tective effect of prosta glandin cimctidine and probanthine[J].Gastroenterlo gy,1987,57(6):85-87.
[10] 叶春,王瑞元,丁益. 热休克对急性运动大鼠骨骼肌中MDA和SOD 的影响[J].中国运 动医学杂志,2002,21(3):25-31.
[11] 王小梅,景会锋.白术对运动应激性溃疡大鼠胃组织中自由基含量及HSP70表达的影响 [J]. 天津体育学院学报,2008,23(5):453-456.
[12] 张国锋,陈易人,等.一氧化氮、内皮素与胃粘膜损伤[J].胃肠病学和肝病学杂志 ,1999.12:293-295.
[13] 赵敬国,王福文.大鼠运动应激性溃疡的实验研究[J].山东体育科技,2001,23(2):2 8-29.
[14] 胡柏平,倪静.运动应激性胃溃疡动物模型的建立及其行为学评价[J].体育科学,2 007,27(11):55-60.
[15] 庞辉,何惠.螺旋藻对力竭运动小鼠胃组织的影响[J].中国临床康复,2006,10(31 ):75-77.
关键词:黄柳菇多糖;力竭运动;应激性溃疡;预防效果
中图分类号:G804.5文献标识码:A文章编号 :1007-3612(2010)01-0059-03
An Experimental Research of Pholiota Adiposa Polysaccharide on E xhaustive Exercise
Rats’ Stress Ulcer Prevention
WU Hequn1, WANG Yong1, LIU Gang2, SHANGGUAN Zhoujian3
(1.Department of Physical Education, Sanming College, Sanming 3 65004, Fujian China; 2. Beijing Sport University,
Beijing 100084, China;3. Sanming Institute of Fungus,Sanming 365000, Fujian China)
Abstract: The research is to investigate pholiota adiposa polysaccharide to exha ustive exercise rats’ stress ulcer prevention. Methods: 30 rats are randomly di vided into three groups: quiet control group, exhaustive exercise group and exha ustive exercise medication group. Training continuing for 6 weeks,The first sev en weeks for the 1st day after exhaustive exercise ,to observe the ulcer index of rats、the organizational structure of the stomac h, SOD, GSHPx, MDA, NOS, ET changes are indicators. Occurred after exhaustivee xercise stress ulcer in rats, the activity of antioxidant enzymes decreases, MDAcontent increases significantly higher ulcer index, but the other two groups ar e different. Exhaustive exercise index ulcer medication group, MDA content is de creased, the activity of antioxidant enzymes than the exhaustive exercise groupimproved significantly. Conclusion: Pholiota adiposa polysaccharide has very goo d antioxidation, and strenuous exercise can alleviate the ischemic state of ga s tric mucosa, playing a role in gastric mucosal protection in order to effectivel y prevent the occurrence of stress ulcer.
Key words: pholiota adiposa polysaccharide; exhaustive exercise; stressulcer; preventive effect
应激性溃疡是指机体在各类应激状态下所引起的一种急性胃粘膜表浅损伤,表现为胃粘膜出 血、糜烂,好发部位在胃体和胃底[1]。运动可引起机体各组织器官代谢发生改变 ,力竭运动作为一种强烈的应激原可导致运动应激性胃溃疡[2]。黄柳菇[Pholiot a adipasa (Fr)Quel]属于真菌门(Eumycota)的一种食药兼用真菌。该菌肉质滑嫩,香味浓 郁,营养丰富,含有丰富的多糖、粗蛋白、氨基酸、维生素、微量元素及总黄酮类化合物等 营养物质[3]。有研究表明黄柳菇多糖是良好的抗氧化剂[4,5]和免疫增强 剂[6],可通过抗氧化损伤、改善细胞内环境、保护生物膜,预防胃肠道溃疡和延 缓肌肉疲劳[7,8]。本实验选用大鼠力竭运动所致的运动应激性溃疡为模型,观察黄 柳菇多糖对运动大鼠应激性溃疡的作用效果,为其应用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物与分组选用SD雄性健康大鼠30只,体重(150±20)g。大鼠饲养温度:(22±1)℃,湿度:59%~61% ,每天光照与黑暗时间各为12 h。所用笼具、饲料、垫料、饮水均高压灭菌(15磅、20 min) 。将大鼠随机分为安静对照组(A)、力竭运动组(B)和力竭运动服药组(C),实验期间,动物 自由摄食、饮水。
1.1.2 黄柳菇多糖的提取将新鲜黄柳菇(由福建省三明真菌研究所选育)依次用自来水、蒸馏水清洗,吸干表面 水分,65℃烘干。烘干后放入高速捣碎机中,制成粉末样品,放入烧杯中,加入20倍分量蒸 馏水,在80℃恒温水浴2 h,然后4 000 r/min离心30 min,取上清液。再用蒸馏水清洗滤渣 数次,离心并合并上清液。黄柳菇粗多糖经纯化(蛋白质用Sevage法除去,单糖、低聚糖等 干扰成分则用乙醇进行沉淀处理)后的沉淀物于65℃的干燥箱中烘干,得黄柳菇多糖。
1.1.3 用药方法服药组每天灌胃2 mL剂量为200 mg/kg体重的黄柳菇多糖,安静对照组和力竭训练组灌 胃同体积的
1.2 方法
1.2.1 大鼠训练模型大鼠进行力竭性跑台运动:运动组以15 m/min,15 min/d进行5 d的适应性运动,休息 两天后进行正式训练期。全程训练分2个阶段:基础训练阶段(4周)和大强度训练阶段(2 周),每周训练5d,灌胃给药30 min后开始训练。基础训练期间,跑速每周递增,分别为15 m /min,19 m/min,23 m/min,27 m/min,(运动强度根据Bedford的最大摄氧量确定,当运 动强度超过90%(速度≧27.2 m/min)最大摄氧量时为大强度)共四周;大强度训练期间每 天训练30 min,速度分别为31 m/min,35 m/min,共二周。
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1.2.2 取材第7周第1d力竭运动后(连续施加机械刺激大鼠不能继续跑动、下跑台 后腹部触地)取胃, 胃取出后,置于冰生理盐水中洗净血液,沿大弯侧剪开后,展平,计算溃 疡指数(按Guth[9]标准计算溃疡数,按溃疡面积大小给予记分:斑点状糜烂为1,糜烂<1 mm,1≤<2 mm为3分,2≤<3 mm为4分,依次类推,损伤宽度超过1 mm,分数加倍。 );然后以生理盐水低温匀浆,制备5%的匀浆液,3 500 r/min离心10 min,取上清液,在1 ~4℃的冰箱保存,待测。
1.2.3 指标测定 超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)、丙二醛(MDA)和一氧化氮合酶(NOS)含量测定,全部使用南京建成生物制剂 公司生产的试剂盒,严格按照说明操作;内皮素(ET)试剂盒购自北京科美东雅生物技术有 限公司,用放射免疫分析法测定。
1.2.4 胃组织光镜制样胃组织经过取材→固定,中性甲醛固定→脱水,二甲苯透明→包埋,采用石蜡包埋→切片, 切片机沿腺胃进行切片→常规粘片、展片、脱腊,采用HE染色。
1.2.5 统计学处理 所有数据采用SPSS12.0软件进行处理。实验 结果以平均数±标准差(X±SD)表示,数据进行组间t-检验,显著性差异选择P<0.05和P< 0.01水平。
2 结 果
2.1 黄柳菇多糖对大鼠胃黏膜溃疡指数(UI)的影响
由表2可见,力竭训练组大鼠出现胃溃疡,溃疡指数为8.62±1.71,与安静对照组相比 有极显著性差异(P<0.01),训练加药组(B)大鼠出现轻微的胃溃疡,溃疡指数为2.97±1 .13,与安静组相比较有显著性差异(P<0.05)。
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2.2 黄柳菇多糖对大鼠血清中SOD、GSH-PX和MDA的影响 表3 结果显示,力竭训练组大鼠血清抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性均高于安静对照组,有著性差 异(P<0.05)。训练服药组血清抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性均高于力竭训练组,有显著 性差异(P<0.05)。力竭训练组MDA含量与安静对照组有极显著性差异(P<0.01) ,训练服药组血清的MDA低于力竭训练组,有显著性差异(P<0.05)。
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2.3 黄柳菇多糖对大鼠胃组织中SOD、GSH-PX和MDA的影响
表4结果显示,力竭训练组大鼠胃组织抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性均高于安静对照组,有著 性差异(P<0.05)。训练服药组胃组织抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性均高于力竭训练组, 分别有显著性差异(P<0.05)和极显著性差异(P<0.01)。力竭训练组MDA含量与安静 对照组有显著性差异(P<0.05),训练服药组血清的MDA低于力竭训练组,有显著性差 异(P<0.05)。
2.4 胃组织光镜观察
2.5 黄柳菇多糖对大鼠胃组织中一氧化氮合酶(NOS)、内皮素(ET)的影响 实验结果表5可见,力竭训练组胃窦组织中的NOS和 ET活性均高于安静组 ,分别有显著性差异(P<0.05)与极显著性差异(P<0.01);力竭服药组分别与安静 组相比存在显著性差异(P<0.05)。
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3 分析与讨论
3.1 黄柳菇多糖对力竭运动大鼠胃组织自由基的影响急性运动和力竭运动都可以导致内源性自由基增多,脂质过氧化反应增强,构成对细胞膜 系统的损害[10]。运动后体内的自由基、脂质过氧化反应增强的机制主要是由于线 粒体的氧化磷酸化、细胞内钙的再聚集和黄嘌呤氧化酶途径产生了大量的自由基[11] ,以及机体内 源性的抗氧化防御系统不能有效地清除自由基。自由基将在体内大量积累,影响运动时细胞 的正常生理功能,表现在引起膜流动性下降的同时伴随通透性改变,离子调节失衡,膜电位 改变,动作电位受到影响,运动能力下降,产生运动性疲劳。而且自由基脂质过氧化反应参 与许多的病理生理过程,如衰老、肿瘤、缺血再灌注、细胞增殖以及放射性损伤等。
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本研究发现力竭运动过程中胃组织产生大量氧自由基,超过了其清除能力,导致胃组织 脂质过氧化水平升高,造成膜系统损伤,氧自由基使含-SH的酶如GSH、Na+-K+-AT Pase 等失活,生理内环境遭到破坏,导致细胞死亡或调亡,自由基损伤是引发运动应激性溃疡的 重要原因之一。黄柳菇多糖具有很好的抗氧化活性、清除自由基和增强免疫力的功效,能提 高抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化反应,起到保护生物膜和延缓疲劳的作用。本研究通过测 定力竭运动服药组运动后胃组织中抗氧化酶SOD、GSH-Px的活性和MDA的含量,结果显示抗氧 化酶SOD、GSH-Px的活性都有显著提高,MDA的含量显著下降,表明力竭运动大鼠胃组织中自 由基生成增多,清除自由基的酶活性下降,服用黄柳菇多糖有利于消除胃组织中自由基,增 强抗氧化能力。
3.2 黄柳菇多糖对大鼠胃组织中一氧化氮合酶(NOS)、内皮素(ET)的影响NO是在NOS催化下产生的,属于胃粘膜防御因子,NOS是NO合成的关键酶,其活性直接影 响NO的合成。一氧化氮(NO)及内皮素(ET)分别作为血管舒张和收缩因子,直接影响溃疡周围 血流,影响细胞氧合作用及粘膜防御能力,NO与ET对调节胃肠道粘膜血流量,维持粘膜完整 性和微血管屏障的正常功能有重要作用。当胃粘膜受损时,NO通过改善其微循环,增加局部 供血供氧起到保护作用。ET是一种重要的致溃疡因子,是已知最强的有收缩作用的血管活性 物质。可使粘膜血管和微血管持续强烈的收缩,使胃粘膜血流量明显减少,导致粘膜损伤。
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本研究发现,力竭运动组NOS的活性高于安静对照组,有显著性差异,ET活性高于安静 对照组,有极显著性差异,表明在力竭运动时扩血管因子与缩血管因子失衡,特别是缩血管 因子的升高,使胃粘膜血流量明显减少,导致溃疡的发生。而力竭运动服药组NOS的活性明 显高于力竭运动组,ET的活性明显低于力竭运动组,表明黄柳菇多糖能改善胃粘膜微循环, 增加供血供氧起到保护作用。
3.3 黄柳菇多糖对大鼠胃黏膜溃疡指数(UI)的影响胃粘膜具有丰富的毛细血管,胃粘膜血管张力的最适调整和胃粘膜微循环的良好血流对 于保护胃粘膜屏障、维持胃粘膜完整性具有重要作用[12]。充足的胃粘膜血流量一 是随时带 走返流到粘膜内的H+以维持粘膜内正常的PH值;二是保证粘膜细胞迅速地新陈代谢而不断提 供丰富的氧和营养物质,以维持正常的细胞功能。胃粘膜损伤的另一个重要原因是内源性扩 血管因子和缩血管因子失衡、胃粘膜微循环调节障碍、胃粘膜血流减少所致[13]。 应激性溃 疡是机体在应激状态下,出现的一种以胃粘膜糜烂或浅表溃疡为特点的急性胃粘膜病变,损 伤多位于粘膜皱襞表面,亦可位于皱襞基底部或皱襞毗邻面,呈点状或线状出血坏死[ 14]。
力竭运动作为一种应激源,可引起大鼠应激性溃疡。溃疡指数反映胃粘膜损伤的程度,如 发生胃溃疡,溃疡指数将发生改变,且溃疡指数大小与胃粘膜损伤程度呈现出正变关系。由于 剧烈运动期间,神经、体液调节导致血液的重新分配,胃肠血流量急骤下降,并随运动的持 续和强度的递增表现得更加明显,造成了运动性胃缺血。而胃粘膜缺血是形成运动应激性溃 疡的最根本条件[15],也是最主要的病理生理过程。本研究发现力竭运动造成胃粘 膜组织出 现严重的溃疡现象,与安静组相比有极显著性差异,溃疡指数8.62±1.71,其原因可能为力 竭运动导致自由基的增多与堆积,脂质过氧化水平升高和胃粘膜血流量减少。而服用黄柳菇 多糖对胃粘膜溃疡有良好的改善,溃疡指数2.97±1.13,其机制与黄柳菇多糖改善了胃粘膜 的保护作用有关。
4 结 论
1) 力竭运动可导致运动应激性溃疡,产生机制可能是自由基损伤和扩血管因子与缩血管因 子失衡所致。
2) 黄柳菇多糖有很好的清除自由基的作用,并可改善胃粘膜的局部血流量,缓解剧烈运动 中胃粘膜的缺血状态,从而减轻在运动应激状态下胃粘膜的损伤。
参考文献:
[1] 张一楚.应激性溃疡[J].上海医学,1999,22(8):454-455.
[2] 林应兴,田景芝,童金华.黄伞的研究进展[J].亚热带农业研究,2009,5(2):90-93 .
[3] 李爽,李燕舞,阿拉木斯.力竭性运动对大鼠胃组织损伤的研究[J].成都体育学院 学报,2008,34(1):81-83.
[4] 黄清荣,辛晓林,钟旭生,等.黄伞菌丝体多糖提取及其抗疲劳活性的研究[J].食品 研究与开发,2005,26(6):6-9.
[5] 吉叶梅,胡秀清,宫春宇,等.黄伞胞外多糖抗自由基作用的研究[J].生物技术,20 07,17(2):29-31.
[6] 史亚丽,蔡德华,王晓洁,等.大负荷运动训练对小鼠免疫功能的影响及黄伞多糖干预 作用研究[J].体育科学,2009,29(6):67-72.
[7] 黄年来.中国食用菌百科[M].北京:中国农业出版社,1993:142.
[8] 张光亚.云南食用菌[M].昆明:云南人民出版社,1984:175-176.
[9] Guth, P,H,et al.Topical aspirin plus Hcl gastric lesion in the rat cytopro tective effect of prosta glandin cimctidine and probanthine[J].Gastroenterlo gy,1987,57(6):85-87.
[10] 叶春,王瑞元,丁益. 热休克对急性运动大鼠骨骼肌中MDA和SOD 的影响[J].中国运 动医学杂志,2002,21(3):25-31.
[11] 王小梅,景会锋.白术对运动应激性溃疡大鼠胃组织中自由基含量及HSP70表达的影响 [J]. 天津体育学院学报,2008,23(5):453-456.
[12] 张国锋,陈易人,等.一氧化氮、内皮素与胃粘膜损伤[J].胃肠病学和肝病学杂志 ,1999.12:293-295.
[13] 赵敬国,王福文.大鼠运动应激性溃疡的实验研究[J].山东体育科技,2001,23(2):2 8-29.
[14] 胡柏平,倪静.运动应激性胃溃疡动物模型的建立及其行为学评价[J].体育科学,2 007,27(11):55-60.
[15] 庞辉,何惠.螺旋藻对力竭运动小鼠胃组织的影响[J].中国临床康复,2006,10(31 ):75-77.