论文部分内容阅读
摘 要：采用高效液相色谱法，以甲醇的醋酸水溶液为流动相、Simpack-VP-ODS为分离柱，在可变波长紫外检测器254nm波长下，对磺酰胺进行定量分析。结果表明，该方法的线性相关系数为0.999 9，标准偏差为 0.43，平均回收率为99.94%，变异系数为0.44%。
关键词：中间体；2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺（磺酰胺）；高效液相色谱法
中图分类号 S13 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2013）03-24-02
Determination of 2-aminosulfonyl-N，N-dimetylnicotinamide by HPLC
Xu Qingfeng1 et al.
（1 Hefei Juji Agriculture develorment Co. LTD ，Hefei 230088，China）
Abstract：A method for analysis of 2-aminosulfonyl-N，N-dimetylnicotinamide（sulphonamide） by HPLC was developed. Samples were dissolved in methanol and acetic acid as mobile phase，Simpack-VP-ODS column and UV detector （254nm） were used for quantitative determination. The results showed that the linear correlaion coefficient was 0.999 9， the standard deviation was 0.43，the average recovery rate was 99.94%，the variation coefficient was 0.44%.
Key words：Intermediate；2-aminosulfonyl-N，N-dimetylnicotinamide（sulphonamide）；HPLC
烟嘧磺隆（nicosulfuron）化学名称为1-（4，6-二甲氧基嘧啶-2-基）-3-（3-二甲基氨基甲磺吡啶-2-基磺酰）脲，是一种新型玉米专用除草剂，具有高效低毒、环境相容性好等特点[1-3]。2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺（以下简称磺酰胺）是合成烟嘧磺隆的重要中间体，是合成路线中反应时间最长、收率最低的一步，用最佳的方法迅速分析出其准确含量，对于下一步生产有着重要意义。磺酰脲类除草剂分子结构中脲桥的热不稳定性，使得其无法直接用GC 或GC–MS 分析测定，目前对烟嘧磺隆原药定量分析基本上都采用高效液相色谱法，而对磺酰胺的分析测定方法尚未见报道[4-8]。本文采用高效液相色谱法，对磺酰胺进行定量分析试验研究，以期得到一个操作简便、快速、准确的分析测定方法，为企业生产过程中的质量控制和质检机构质量检测提供参考依据。
1 材料与方法
11 试剂与材料 甲醇、冰醋酸 （色谱纯，天津四友）； 2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺（磺酰胺）（98%，青岛寒冰化工有限公司）；磺酰胺试样（合肥久易农业开发有限公司）；超纯水。
12 仪器和设备 岛津高效液相色谱仪，配高压泵、可变波长紫外检测器、Simpack-VP-ODS分离色谱柱、色谱工作站等；过滤器；微量进样器；超声波清洗器等。
13 试验方法
131 溶液的配制 （1）标准溶液的配制。称取磺酰胺标准品002g（准确至0000 2g）于50mL容量瓶中，加入适量甲醇溶解，置此容量瓶于超声波浴槽中约5min，取出冷却至室温后，用甲醇定容至刻度，摇匀备用。（2）试样溶液的配制。称取磺酰胺试样002g（准确至0000 2g）于50mL容量瓶中，加入适量甲醇溶解，置此容量瓶于超声波浴槽中约5min，取出冷却至室温后，用甲醇定容至刻度，摇匀备用。
132 高效液相色谱分析条件 试样用甲醇溶解，以甲醇-冰醋酸水溶液为流动相，用Simpack-VP-ODS分离色谱柱和紫外检测器（254nm）对试样进行高效液相色谱分离和测定。具体分析条件如下：色谱柱：Simpack-VP-ODS，250mm×46mm（id）不锈钢柱，粒径：5μm；柱温：室温（温差变化不大于2℃）；流动相：甲醇/水/冰醋酸=55/45/02（V/V），经045μm孔径的滤膜过滤，并在超声波浴槽中超声脱气15min，流速：10mL/min；检测波长：254nm；进样体积：20μL；保留时间：32min。
133 标准曲线、准确度和精密度 （1）标准曲线。称取磺酰胺标准品（准确至0000 2g）于50mL容量瓶中，按试验方法配制磺酰胺标准溶液，移取该溶液1、2、3、4、5、6、8mL于7个10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。并用高效液相色谱分析进行测定，以磺酰胺溶液的质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标作图，得到相应的线性关系曲线。（2）添加回收率。称取5份已知确切含量的磺酰胺试样，分别加入磺酰胺标准品20mg进行测定，计算回收率，结果要满足农药原药分析的要求。 （3）精密度。称取磺酰胺标准品002g（准确至0000 2g）于50mL容量瓶中，余同标准溶液的配制，8 次重复。
134 测定与计算方法 在高效液相色谱操作条件下，待仪器基线稳定后连续注入数针标准溶液，直至相邻2针的峰面积<15%时，按标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进行测定。将测得的2针试样溶液和试样溶液前后2针标准溶液中的磺酰胺的峰面积分别进行平均。试样中磺酰胺的质量分数X（%），以式计算：
X=A2m1PA1m2 式中：A1——标样溶液中磺酰胺的峰面积平均值；A2——样品溶液中磺酰胺的峰面积平均值；m1——磺酰胺标样的质量，g；m2——磺酰胺试样的质量，g；P ——磺酰胺标样的含量，%。
2次平行测定结果之差不大于15%，其算术平均值为测定值。
2 结果与分析
21 高效液相色谱分析条件选择结果 （1）检测波长选择。通过多次波长调解实验发现：磺酰胺在254nm下杂质吸收较小，主峰和杂质峰（溶剂峰）的分离效果较好，因此，本实验选择254nm作为检测波长。（2）流动相选择。经多次配比实验发现，用Simpack-VP-ODS分离色谱柱，以甲醇∶ 水∶ 冰醋酸=55∶ 45∶ 02（V/V/V）的混合液为流动相，流速为10mL/min时，分析时间较短，峰形尖锐、对称，且保留时间适中，可使样品中有效成分及其杂质得到较好的分离。以上述色谱分析条件测定的磺酰胺标样和典型的磺酰胺样品的高效液相色谱图如图1和图2所示：
图1 磺酰胺标样高效液相色谱图
图2 磺酰胺样品高效液相色谱图
22 标准曲线 标准曲线方程及相关系数为：y= 651 110x + 28 501， R2 = 0999 9。
23 准确度与精密度 平均回收率为9952%，RSD为085%，标准偏差为043，变异系数为044%。
3 结论
建立了用Simpack-VP-ODS分离色谱柱，以甲醇∶ 水∶ 冰醋酸=55∶ 45∶ 02（V/V/V）的混合液为流动相，254nm作为检测波长的烟嘧磺隆中间体2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺的高效液相色谱分析方法，该方法具有定量准确、重复性好、分析速度快，线性关系良好、操作简单等特点，是目前测定2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺较为理想的方法。
参考文献
[1]罗伟， 沈健英 磺酰脲类除草剂的研究进展 [J] 世界农药， 2008， 30 （1）： 16–21
[2]刘长令 磺酰脲类除草剂 [J] 农药， 2002， 41 （3）： 44–45
[3]范志金， 刘丰茂， 钱传范 磺酰脲类除草剂的现状和发展趋势分析[J] 农药， 1999， 38 （5）： 6–9
[4]胡先文， 叶发兵， 董元彦 水中甲磺隆的气相色谱分析研究 [J] 光谱实验室， 2003， 20 （4）： 18–21
[5]吴岩， 杨长志， 刘永， 等 气相色谱–质谱法测定大豆中豆磺隆的残留量 [J] 分析试验室， 2008， 27 （3）： 80–83
[6]吴春先， 高立明， 王广成， 等 烟嘧磺隆的高效液相色谱分析 [J]农药科学与管理， 2006， 25 （10）： 6–9
[7]白丽萍， 关爱莹 高效液相色谱法测定乙氧嘧磺隆 [J] 农药， 2003，42 （2）： 52
[8]FAO Specifications and Evaluations for Agricultural PesticidesNicosulfuron [S] Rome，2006
（责编：张宏民） 19卷03期张贤萍 蓝莓组培分化苗瓶外架空生根育苗关键技术研究
关键词：中间体；2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺（磺酰胺）；高效液相色谱法
中图分类号 S13 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2013）03-24-02
Determination of 2-aminosulfonyl-N，N-dimetylnicotinamide by HPLC
Xu Qingfeng1 et al.
（1 Hefei Juji Agriculture develorment Co. LTD ，Hefei 230088，China）
Abstract：A method for analysis of 2-aminosulfonyl-N，N-dimetylnicotinamide（sulphonamide） by HPLC was developed. Samples were dissolved in methanol and acetic acid as mobile phase，Simpack-VP-ODS column and UV detector （254nm） were used for quantitative determination. The results showed that the linear correlaion coefficient was 0.999 9， the standard deviation was 0.43，the average recovery rate was 99.94%，the variation coefficient was 0.44%.
Key words：Intermediate；2-aminosulfonyl-N，N-dimetylnicotinamide（sulphonamide）；HPLC
烟嘧磺隆（nicosulfuron）化学名称为1-（4，6-二甲氧基嘧啶-2-基）-3-（3-二甲基氨基甲磺吡啶-2-基磺酰）脲，是一种新型玉米专用除草剂，具有高效低毒、环境相容性好等特点[1-3]。2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺（以下简称磺酰胺）是合成烟嘧磺隆的重要中间体，是合成路线中反应时间最长、收率最低的一步，用最佳的方法迅速分析出其准确含量，对于下一步生产有着重要意义。磺酰脲类除草剂分子结构中脲桥的热不稳定性，使得其无法直接用GC 或GC–MS 分析测定，目前对烟嘧磺隆原药定量分析基本上都采用高效液相色谱法，而对磺酰胺的分析测定方法尚未见报道[4-8]。本文采用高效液相色谱法，对磺酰胺进行定量分析试验研究，以期得到一个操作简便、快速、准确的分析测定方法，为企业生产过程中的质量控制和质检机构质量检测提供参考依据。
1 材料与方法
11 试剂与材料 甲醇、冰醋酸 （色谱纯，天津四友）； 2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺（磺酰胺）（98%，青岛寒冰化工有限公司）；磺酰胺试样（合肥久易农业开发有限公司）；超纯水。
12 仪器和设备 岛津高效液相色谱仪，配高压泵、可变波长紫外检测器、Simpack-VP-ODS分离色谱柱、色谱工作站等；过滤器；微量进样器；超声波清洗器等。
13 试验方法
131 溶液的配制 （1）标准溶液的配制。称取磺酰胺标准品002g（准确至0000 2g）于50mL容量瓶中，加入适量甲醇溶解，置此容量瓶于超声波浴槽中约5min，取出冷却至室温后，用甲醇定容至刻度，摇匀备用。（2）试样溶液的配制。称取磺酰胺试样002g（准确至0000 2g）于50mL容量瓶中，加入适量甲醇溶解，置此容量瓶于超声波浴槽中约5min，取出冷却至室温后，用甲醇定容至刻度，摇匀备用。
132 高效液相色谱分析条件 试样用甲醇溶解，以甲醇-冰醋酸水溶液为流动相，用Simpack-VP-ODS分离色谱柱和紫外检测器（254nm）对试样进行高效液相色谱分离和测定。具体分析条件如下：色谱柱：Simpack-VP-ODS，250mm×46mm（id）不锈钢柱，粒径：5μm；柱温：室温（温差变化不大于2℃）；流动相：甲醇/水/冰醋酸=55/45/02（V/V），经045μm孔径的滤膜过滤，并在超声波浴槽中超声脱气15min，流速：10mL/min；检测波长：254nm；进样体积：20μL；保留时间：32min。
133 标准曲线、准确度和精密度 （1）标准曲线。称取磺酰胺标准品（准确至0000 2g）于50mL容量瓶中，按试验方法配制磺酰胺标准溶液，移取该溶液1、2、3、4、5、6、8mL于7个10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。并用高效液相色谱分析进行测定，以磺酰胺溶液的质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标作图，得到相应的线性关系曲线。（2）添加回收率。称取5份已知确切含量的磺酰胺试样，分别加入磺酰胺标准品20mg进行测定，计算回收率，结果要满足农药原药分析的要求。 （3）精密度。称取磺酰胺标准品002g（准确至0000 2g）于50mL容量瓶中，余同标准溶液的配制，8 次重复。
134 测定与计算方法 在高效液相色谱操作条件下，待仪器基线稳定后连续注入数针标准溶液，直至相邻2针的峰面积<15%时，按标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进行测定。将测得的2针试样溶液和试样溶液前后2针标准溶液中的磺酰胺的峰面积分别进行平均。试样中磺酰胺的质量分数X（%），以式计算：
X=A2m1PA1m2 式中：A1——标样溶液中磺酰胺的峰面积平均值；A2——样品溶液中磺酰胺的峰面积平均值；m1——磺酰胺标样的质量，g；m2——磺酰胺试样的质量，g；P ——磺酰胺标样的含量，%。
2次平行测定结果之差不大于15%，其算术平均值为测定值。
2 结果与分析
21 高效液相色谱分析条件选择结果 （1）检测波长选择。通过多次波长调解实验发现：磺酰胺在254nm下杂质吸收较小，主峰和杂质峰（溶剂峰）的分离效果较好，因此，本实验选择254nm作为检测波长。（2）流动相选择。经多次配比实验发现，用Simpack-VP-ODS分离色谱柱，以甲醇∶ 水∶ 冰醋酸=55∶ 45∶ 02（V/V/V）的混合液为流动相，流速为10mL/min时，分析时间较短，峰形尖锐、对称，且保留时间适中，可使样品中有效成分及其杂质得到较好的分离。以上述色谱分析条件测定的磺酰胺标样和典型的磺酰胺样品的高效液相色谱图如图1和图2所示：
图1 磺酰胺标样高效液相色谱图
图2 磺酰胺样品高效液相色谱图
22 标准曲线 标准曲线方程及相关系数为：y= 651 110x + 28 501， R2 = 0999 9。
23 准确度与精密度 平均回收率为9952%，RSD为085%，标准偏差为043，变异系数为044%。
3 结论
建立了用Simpack-VP-ODS分离色谱柱，以甲醇∶ 水∶ 冰醋酸=55∶ 45∶ 02（V/V/V）的混合液为流动相，254nm作为检测波长的烟嘧磺隆中间体2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺的高效液相色谱分析方法，该方法具有定量准确、重复性好、分析速度快，线性关系良好、操作简单等特点，是目前测定2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺较为理想的方法。
参考文献
[1]罗伟， 沈健英 磺酰脲类除草剂的研究进展 [J] 世界农药， 2008， 30 （1）： 16–21
[2]刘长令 磺酰脲类除草剂 [J] 农药， 2002， 41 （3）： 44–45
[3]范志金， 刘丰茂， 钱传范 磺酰脲类除草剂的现状和发展趋势分析[J] 农药， 1999， 38 （5）： 6–9
[4]胡先文， 叶发兵， 董元彦 水中甲磺隆的气相色谱分析研究 [J] 光谱实验室， 2003， 20 （4）： 18–21
[5]吴岩， 杨长志， 刘永， 等 气相色谱–质谱法测定大豆中豆磺隆的残留量 [J] 分析试验室， 2008， 27 （3）： 80–83
[6]吴春先， 高立明， 王广成， 等 烟嘧磺隆的高效液相色谱分析 [J]农药科学与管理， 2006， 25 （10）： 6–9
[7]白丽萍， 关爱莹 高效液相色谱法测定乙氧嘧磺隆 [J] 农药， 2003，42 （2）： 52
[8]FAO Specifications and Evaluations for Agricultural PesticidesNicosulfuron [S] Rome，2006
（责编：张宏民） 19卷03期张贤萍 蓝莓组培分化苗瓶外架空生根育苗关键技术研究