【摘 要】
：
目的:构建小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因的腺相关病毒载体.方法:利用RT-PCR方法,从Balb/C小鼠脾细胞的mRNA中扩增T-bet基因全长cDNA,经测序证实后插入Pzac2.1质粒,用磷
【机 构】
：
江苏大学附属医院儿科,江苏,镇江,212001;江苏大学检验医学研究所,江苏,镇江,212001;江苏大学生命科学院,江苏镇江,212013
论文部分内容阅读
目的:构建小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因的腺相关病毒载体.方法:利用RT-PCR方法,从Balb/C小鼠脾细胞的mRNA中扩增T-bet基因全长cDNA,经测序证实后插入Pzac2.1质粒,用磷酸钙沉淀法,与pAddeltaF6及p5E18质粒共转染293细胞,包装成重组的病毒颗粒,并通过抽提病毒DNA进行PCR扩增鉴定重组病毒的形成,设立eGFP基因为对照.结果:1592 bp的小鼠T-bet基因被成功克隆,分析表明,与Genbank中发表的序列相比具有99.8%的同源性.重组质粒Pzac2.1-T-bet的PCR及酶切鉴定表明T-bet基因被定向插入,与pAddeltaF6及p5E18质粒共转染293细胞包装成病毒后,经荧光显微镜和病毒DNA的PCR检测,证实已完成对重组病毒的包装.结论:成功构建了小鼠T-bet基因的腺相关病毒载体rAAV-T-bet,为免疫紊乱性疾病的T-bet基因干预治疗奠定了基础.
其他文献
介绍了基于文档矢量模型进行文档相关度计算的面向职业教育的主题蜘蛛,并结合页面链接上下文信息对URL进行预过滤,可采用多机并行下载提高收集效率。在一个面向Internet的职
输电钢管塔设计工况复杂,强度、刚度及稳定性计算工作量大且多为重复性工作.根据钢管塔设计需要,以计算机参数化设计方法代替传统的设计方法,运用Access数据库技术,结合AutoC
目的:通过环磷酰胺对大鼠睾丸组织中干细胞因子的表达及增殖指数影响的研究,以探讨环磷酰胺所致生精功能损害的原因。方法:选取9天龄雄性Wistar大鼠,腹腔注射大、中、小剂量
蛋白质组学研究细胞内蛋白质组成及其活动规律是对不同时间和空间发挥功能的特定蛋白质群体的研究.通过比较分析不同条件蛋白质组的差异表达,着眼发现和鉴定出有差异的蛋白质
目的:在总结分析传统的血管解剖学研究技术基础上对全身性血管造影术进行重点探讨.方法:应用不同强度的明胶、不同的明胶-氧化铅配方及其多种不同组合方式的X线参数反复进行
乌骨鸡脂肪油是乌骨鸡重要的营养成份之一,其脂肪酸组成更是影响肉质风味的重要化学成分.以氯仿:甲醇(2:1)超声提取乌骨鸡中脂肪油,皂化后,用三氟化硼-甲醇法甲酯化,应用气相
控制策略参数优化是提高混合动力汽车燃油经济性和降低排放的关键,这类优化问题涉及多个相互冲突目标,而且属于非线性约束问题。文中采用遗传算法,基于MATLAB编程,调用ADVISO
由于涂料型墨水中颜料着色原理和发色特性的限制,涂料墨水印花图案的颜色深度和鲜艳度远低于染料型墨水.现通过采用加热台板的方法,提高打印织物的布面温度,喷墨印花清晰度大
目的分析体外培养的不同亚型上皮性卵巢癌细胞系蛋白质表达差异,筛选卵巢癌的肿瘤标志物。方法提取体外培养的不同亚型上皮性卵巢癌细胞系(OVCAR-3、SKOV-3、3AO和TOV-112D)
本文介绍了Quantum PLC在400平方米烧结机自动控制系统中的应用,及自动控制系统的组成、特点和功能.