小干扰RNA下调核因子IA对人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响

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目的

观察核因子IA(NFIA)在胶质瘤中的表达及对胶质瘤生物学功能的影响。

方法

采用免疫组织化学法检测49例胶质瘤组织和10例正常脑组织中NFIA的表达。使用RNA干扰技术处理胶质瘤U251细胞,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和Western blot检测NFIA表达水平的变化,分别采用噻唑蓝法(MTT)、划痕实验及Transwell侵袭实验,检测敲低NFIA表达对胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的变化;Western blot检测相关蛋白表达变化。

结果

免疫组织化学检测结果显示NFIA在胶质瘤组织中的表达明显高于正常脑组织。下调胶质瘤细胞中NFIA表达后:MTT实验显示阴性对照组(1.367±0.021)与空白对照组(1.330±0.046)细胞生长差异无统计学意义(P=0.500),NFIA干扰组(0.823±0.096)细胞生长明显减慢,与阴性对照组与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P=0.001)。划痕实验显示NFIA干扰组细胞迁移距离(57.9±6.9) μm明显低于阴性对照组[(125.4±10.7) μm]和空白对照组[(111.5±5.9) μm],差异有统计学意义(P=0.001),Transwell实验显示RNA干扰组穿膜细胞数[(33.3±3.2)个]低于阴性对照组和空白对照组[(80.3±4.5)、(87.7±5.0)个],差异有统计学意义(P=0.001)。Western blot结果显示,NFIA干扰组Ezrin蛋白相对表达(0.33±0.05)显著低于阴性对照组(1.08±0.08)与空白对照组(1.00±0.05),p21蛋白相对表达(1.02±0.08)显著低于阴性对照组(0.25±0.04)与空白对照组(0.29±0.03),差异均有统计学意义(P=0.001)。

结论

NFIA在胶质瘤组织中高表达,下调NFIA表达可抑制胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力。

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