【摘 要】
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目的:探讨依托咪酯对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及其对环状RNA-CCND1(circ-CCND1)/微小RNA-214-5p(miR-214-5p)分子轴的调控作用.方法:体外培养大鼠心肌细胞H9C2,使用H/R处理细胞建立细胞损伤模型,分别加入不同浓度的依托咪酯处理H9C2细胞,分别将si-NC、si-circ-CCND1转染至H9C2细胞进行H/R处理,后续实验中分别将pcDNA、pcDNA-circ-CCND1转染至H9C2细胞,使用依托咪酯处理后进行H/R处理;根据试剂盒说明书检
【机 构】
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广安市人民医院 四川广安638000
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目的:探讨依托咪酯对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及其对环状RNA-CCND1(circ-CCND1)/微小RNA-214-5p(miR-214-5p)分子轴的调控作用.方法:体外培养大鼠心肌细胞H9C2,使用H/R处理细胞建立细胞损伤模型,分别加入不同浓度的依托咪酯处理H9C2细胞,分别将si-NC、si-circ-CCND1转染至H9C2细胞进行H/R处理,后续实验中分别将pcDNA、pcDNA-circ-CCND1转染至H9C2细胞,使用依托咪酯处理后进行H/R处理;根据试剂盒说明书检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性与乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)的水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;采用qRT-PCR检测circ-CCND1、miR-214-5p的表达量;双荧光素酶报告实验检测circ-CCND1、miR-214-5p的靶向关系;Western blot法检测微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白轻链3 Ⅰ(LC3-Ⅰ)、自噬相关基因Beclin-1蛋白表达量并计算LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值.结果:H/R诱导的H9C2细胞中LDH、MDA的水平与凋亡率及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、Beclin-1蛋白水平显著升高(P＜0.05),SOD、CAT的活性降低(P＜0.05),circ-CCND1的表达水平显著升高(P＜0.05),miR-214-5p的表达水平显著降低(P＜0.05),而依托咪酯能够明显逆转H/R对H9C2细胞氧化应激、凋亡、自噬及circ-CCND1、miR-214-5p表达量的影响(P＜0.05);circ-CCND1可靶向结合miR-214-5p;转染si-circ-CCND1可明显降低LDH、MDA的水平与凋亡率及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、Beclin-1蛋白水平(P＜0.05),提高SOD、CAT的活性(P＜0.05);转染pcDNA-circ-CCND1可明显降低依托咪酯对H/R诱导的H9C2细胞氧化应激、凋亡及自噬的作用(P＜0.05).结论:依托咪酯可通过下调circ-CCND1表达、上调miR-214-5p表达从而抑制H/R诱导的心肌细胞氧化应激、凋亡及自噬,进而减轻心肌细胞损伤.
其他文献
目的 报道一例嵌合型i(20)(q10)伴15q21.2微缺失胎儿的病例,并通过复习相关文献探讨其基因型及表型的相关性,为临床遗传咨询提供参考.方法 于孕19 w+5 d抽取胎儿羊水,分别行G显带染色体核型分析,产前细菌人工染色体微球(BoBs)检测和单核苷酸多态性微阵列芯片(SNP array)检测确诊该病例并复习相关文献.结果 (1)确诊该病例:胎儿羊水染色体核型为46,XY,i(20)(q10)[9]/46,XY[41],其父母染色体核型均未见异常.产前BoBs检测结果未见异常.胎儿SNP arra
报告收治1例9月龄患儿,发育迟滞,肌张力异常,智力轻度缺陷,通过外周血染色体核型分析和低测序深度基因组拷贝数变异分析(copy number variation sequencing,CNV-seq)对其病因进行深入的遗传学检测和分析,CNV-seq结果显示患儿在2号染色体q32.3-q36.3处重复31.90 Mb,根据ACMG评级为致病性;患儿及其父亲外周血染色体核型分别为46,XY,der(18)t(2;18)(q32;p11.2)pat和46,XY,t(2;18)(q32;p11.2),说明患儿是
目的 对极低出生体质量早产儿经母乳获得性巨细胞病毒(CMV)感染的临床特征以及随访情况进行分析.方法 收集2018年1月至2019年1月我院新生儿科80例极低出生体质量早产儿的临床资料,分析极低出生体质量早产儿母乳获得性巨细胞病毒感染的发病率、临床特征以及随访至早产儿半岁.结果 80例极低出生体质量早产儿中经母乳获得性巨细胞病毒感染20例,感染率为25.00％;感染组出生时体质量、出生时胎龄、母乳CMV阳性率、血小板及中性粒细胞均低于非感染组(P＜0.05),而谷丙转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST
目的 分析研究我院喂养不耐受早产儿静脉营养进行早期小剂量补钾安全性的相关性研究.方法 选择2018年1月至2020年1月在我院收治的200例符合纳入标准的早产儿,随机分为观察组和对照组,均为100例.观察组采用静脉补钾的方法,在早期小剂量[1 mmol/(L·kg·d)]静脉补钾.对比一般资料,分析对比两组患儿第3天、第7天后血钾水平,出现低钾血症、高钾血症情况,以及喂养不耐受改善情况,完全胃肠道营养时间,呕吐,腹胀消失时间,进奶量,大便次数,住院天数等临床症状指标以及临床疗效.结果 观察组在早期补钾后血
目的 回顾性分析本地区新生儿原发性肉碱缺乏症(PCD)筛查情况,探讨本地区新生儿PCD发病率及诊治情况,以更好地指导筛查工作.方法 选取本地区2016年7月-2020年12月出生48 h后经充分哺乳的新生儿115720例,采足跟血片,应用串联质谱技术检测血片游离肉碱和酰基肉碱水平,对可疑阳性新生儿进行尿有机酸分析、母亲串联质谱检测及基因检测等以明确诊断.结果 本地区2016年7月-2020年12月共筛查新生儿115720例,确诊PCD新生儿8例,PCD母亲8例;新生儿PCD发病率为1/14465,分娩母亲
目的 建立新疆地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症筛查最适宜的切值,并探讨性别、孕周、出生体重与G6PD活性水平的关系.方法 对新疆部分地区2019年10月至2021年1月出生的9681例新生儿G6PD筛查结果进行分析,结合性别、孕周、出生体重等因素采用百分位数法确定切值.结果 新生儿筛查的G6PD检测最佳阳性切值为26.2 U/dL;不同性别、出生体重新生儿的G6PD活性水平亦有显著性差异(P＜0.05);不同孕周新生儿足跟血G6PD活性分布差异无统计学意义(P＞0.05).结论 新生儿葡
多囊卵巢综合征(PCOS)是一种常见的妇科内分泌紊乱疾病,以稀发排卵或无排卵、卵巢多囊样改变和高雄激素血症为主要特征.育龄期妇女的患病率为5％～15％.30％～40％的PCOS患者出现过自然流产.PCOS以病程长、难治愈、受孕率低、流产率高等特点,给患者及其所在家庭带来巨大的精神和经济压力.研究发病机制对于治疗PCOS具有重要意义.有关PCOS自然流产的发病机制尚未完全明了,本文研究查阅了大量相关文献,分别从高雄激素血症、胰岛素抵抗、体质量指数(BMI)和血脂异常、高同型半胱氨酸血症、氧化应激和慢性炎症、
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目的:优化甘露糖(MAN)修饰姜黄素(Cur)/人参皂苷Rb1(GS-Rb1)共载脂质体(Lip)的处方,考察其体外靶向能力.方法:通过薄膜分散法-硫酸铵梯度法制备MAN-Cur/GS-Rb1-Lips,以包封率为考察指标,采用星点设计响应面法确定MAN-Cur/GS-Rb1-Lips最佳处方.采用荧光显微镜法考察了 MAN-Cur/GS-Rb1-Lips在小鼠脑微血管内皮细胞(bEND.3)和小鼠来源神经瘤母细胞(N2a)主动靶向性.结果:通过Box-Behnken响应面法,最终确定脂质体的最优处方为D