【摘 要】
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目的 观察人促甲状腺激素受体(human thyrotropin receptor,hTSHR)膜外区N端(氨基酸29~280区域)的抗原性及其与格雷夫斯病(Graves病)发病的关系.方法 提取人正常甲状腺组织总R
【机 构】
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人体寄生虫学教研室,天津医科大学病理生理学教研室,天津医科大学代谢病医院内分泌学研究所卫生部重点实验室,天津医科大学免疫学教研室
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目的 观察人促甲状腺激素受体(human thyrotropin receptor,hTSHR)膜外区N端(氨基酸29~280区域)的抗原性及其与格雷夫斯病(Graves病)发病的关系.方法 提取人正常甲状腺组织总RNA,反转录后进行PCR,扩增产物与表达载体pcDNA3.1进行连接得到重组质粒pcDNA3.1/hTSHR188-940bp.用重组质粒免疫Balb/c小鼠,检测小鼠血清中甲状腺素(thyroxin,T4)、抗TsHR抗体(anti-TSHR antibody,TRAb)、甲状腺刺激抗体(thyroid stimulating antibody,TSAb)水平的变化,光镜下观察甲状腺组织的结构变化.结果 PCR扩增得到hTSHR膜外区N端753 bp的基因片段hTSHRl88-940bp,该片段与表达载体pcDNA3.1连接后,经HindⅢ酶切和核苷酸序列测定方法鉴定证实hTSHR188~940bp片段插入序列和方向正确.用pcDNA3.1/hTSHR188~940 bp免疫Balb/c小鼠后发现,血清TRAb水平从第6周(0.148±0.018)开始升高,到第10周(0.134±0.011)一直维持在比较高的水平,与第0周(0.106±0.006)比较,差异均有统计学意义(P<0.01).血清T4、TSAb水平在第10周[(62.20±12.77)μg/L、1.392±0.615]出现明显升高,与第0周[(41.02±7.97)μg/L、0.864±0.076]比较,差异均有统计学意义(P<0.01).甲状腺病理学检查发现大部分小鼠甲状腺滤泡上皮增生,滤泡腔增大,偶见炎细胞浸润.结论 TSHR188~940bp编码的hTSHR膜外区N端氨基酸29~280区域抗原决定簇使机体产生TSAb,从而导致甲状腺功能亢进,出现类Graves病表现,说明TSHR的这个区域与Graves病密切相关,可能是导致该病的重要因素.
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