【摘 要】
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目的探讨大黄虫丸治疗慢性粒细胞白血病的可能作用机理。方法将CXCR4基因定向克隆到含有双启动子的真核表达载体p Bud CE4.1,经转染入K562细胞,筛选获得能稳定高表达人CXCR
【机 构】
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山东中医药大学中西医结合临床学院,山东省潍坊市中医院,
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目的探讨大黄虫丸治疗慢性粒细胞白血病的可能作用机理。方法将CXCR4基因定向克隆到含有双启动子的真核表达载体p Bud CE4.1,经转染入K562细胞,筛选获得能稳定高表达人CXCR4蛋白的K562/CXCR4细胞。16只裸鼠随机分为空白组和大黄虫丸大、中、小剂量组,每组4只。大黄虫丸大、中、小剂量组分别给予大黄虫丸270、135、70 mg/ml灌胃,每次3ml,空白组给予生理盐水3 ml灌胃,均每天1次,连续给药3天,第3天每隔2h给药1次,连续给药3次,末次给药1 h后,心脏采血,分离血清,制备大黄虫丸含药血清。应用MTT法检测不同浓度大黄虫丸含药血清对K562/CXCR4细胞增殖的影响,TUNEL法检测其对K562/CXCR4细胞凋亡的影响,Western blotting法检测各组细胞CXCR4表达的变化。结果与空白组比较,大黄虫丸大、中、小剂量组细胞在24、48、72、96 h时吸光度A490均明显降低(P<0.01);大黄虫丸大、中、小剂量组作用时间越长、药物浓度越高,细胞的抑制率越高。空白组细胞凋亡率为0.28%,大黄虫丸大、中、小剂量组细胞凋亡率分别为60.79%、28.91%和10.14%。大黄虫丸大、中、小剂量组细胞中CXCR4表达较空白组明显降低,并且随剂量增大CXCR4表达降低。结论大黄虫丸可能通过抑制K562/CXCR4细胞增殖,诱导其凋亡,并影响CXCR4的表达,进而干预慢性粒细胞白血病的发生发展过程。
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