酵母双杂诱饵表达载体pGBKT7-S1-G/pGBKT7-S1-J的构建

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S1是水稻( Oryza sativa L.)种间杂种不育一个最重要的基因座,对杂种的雌雄配子都有选择性杀灭作用。通过构建S1基因的酵母诱饵载体,进行相应水稻品种酵母表达文库的筛选,得到S1蛋白作用的下游因子,对S1基因如何控制杂种不育的分子机理了解有重要意义。本研究通过RT-PCR扩增获得了S1基因CDS序列,测序后与pGBKT7酵母诱饵载体连接构建了pGBKT7-S1-G/pGBKT7-S1-J,再双酶切鉴定并转化酵母菌株AH109,S1蛋白在酵母菌株中能正确稳定表达,未表现出毒性和自激活性。此酵母诱
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