【摘 要】
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目的:探讨锌指蛋白GATA6(GATA6)小分子干扰RNA(siRNA)对肝癌HCC-9204细胞自噬和周期的影响及机制.方法:肝癌HCC-9204细胞中转染GATA6 siRNA、siRNA control,定量即时聚合酶链锁反应(qRT-PCR)方法检测GATA6mRNA表达;Western blot方法检测GATA6、卷曲螺旋状Myosin样Bcl-2相互作用蛋白(beclin1)、自噬相关基因3(ATG3)、磷酸化信号转导与转录因子3(p-STAT3)蛋白表达;流式细胞术检测细胞周期.STAT3信
【机 构】
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湖南中医药高等专科学校附属第一医院(湖南省直中医医院)检验科 湖南 株洲 412000;湖南中医药高等专科学校附属第一医院(湖南省直中医医院)病理科 湖南 株洲 412000
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目的:探讨锌指蛋白GATA6(GATA6)小分子干扰RNA(siRNA)对肝癌HCC-9204细胞自噬和周期的影响及机制.方法:肝癌HCC-9204细胞中转染GATA6 siRNA、siRNA control,定量即时聚合酶链锁反应(qRT-PCR)方法检测GATA6mRNA表达;Western blot方法检测GATA6、卷曲螺旋状Myosin样Bcl-2相互作用蛋白(beclin1)、自噬相关基因3(ATG3)、磷酸化信号转导与转录因子3(p-STAT3)蛋白表达;流式细胞术检测细胞周期.STAT3信号激活剂处理转染GATA6 siRNA后的肝癌HCC-9204细胞,用上述方法检测细胞周期和beclin1、ATG3、p-STAT3蛋白表达.结果:与转染siRNA control后的肝癌HCC-9204细胞比较,转染GATA6 siRNA可以降低细胞中GATA6 mRNA和蛋白表达量,提高细胞G0/G1期比例,减少细胞中beclin1、ATG3、p-STAT3蛋白表达.STAT3信号激活剂可以降低转染GATA6 siRNA后的肝癌HCC-9204细胞G0/G1期比例,提高细胞中beclin1、ATG3、p-STAT3蛋白表达水平.结论:GATA6 siRNA抑制肝癌HCC-9204细胞自噬并阻滞细胞周期,作用机制与降低 STAT3信号通路激活水平有关.
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