【摘 要】
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目的 探讨骨形态发生蛋白/维甲酸诱导的神经特异性蛋白3(Brinp3)在丙戊酸钠(VPA)诱导神经干细胞向神经元分化过程中的作用.方法 体外培养大鼠海马神经干细胞,运用Real-time P
【机 构】
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南通大学医学院人体解剖学系,江苏省神经再生重点实验室,神经再生协同创新中心,江苏南通226001
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目的 探讨骨形态发生蛋白/维甲酸诱导的神经特异性蛋白3(Brinp3)在丙戊酸钠(VPA)诱导神经干细胞向神经元分化过程中的作用.方法 体外培养大鼠海马神经干细胞,运用Real-time PCR和Western blotting技术在VPA诱导神经干细胞分化后24 h和48 h检测Brinp3的表达;Real-time PCR检测Brinp3在成年大鼠各组织中以及在神经干细胞、星形胶质细胞和神经元中的表达水平;在神经干细胞中转染Brinp3小干扰RNA(siRNA)并诱导分化24 h后,运用Real-time PCR、Western blotting和免疫荧光技术检测Brinp3和神经元标志分子的表达.以上实验均包含5次生物学重复.结果 与对照组相比,VPA处理组中Brinp3的mRNA和蛋白水平在24 h和48 h均显著上调(P＜0.05);Brinp3在脑组织中呈优势表达;Brinp3在星形胶质细胞中表达较低,而在神经元中表达较高(P＜O.001);在神经干细胞中转染Brinp3 siRNA,诱导分化24h后,Brinp3的表达被显著抑制(P＜0.001),神经元标志分子的表达均显著下调(P＜0.01),第4天分化成的神经元比例减少(P＜0.001).结论 Brinp3表达的上调可能介导了VPA促神经干细胞向神经元分化的功能.
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