人组织激肽释放酶成熟蛋白在大肠杆菌中的高效表达

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ziyufenyang

【摘要】

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将编码人组织激肽释放酶成熟蛋白的基因片段扩增并分别克隆到原核表达载体pET28(b)及分泌型表达载体pET20(b)中,使其C端融合6×His Tag序列.转化不同受体菌,IPTG诱导表达

【作者】

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李体远杜珙蔡筱彦石之磷黄瑞芳陈德珩戴

【机构】

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暨南大学医学院第二附属医院

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2003年3期

【关键词】

：

人组织激肽释放酶大肠杆菌高效表达

【基金项目】

：

深圳市科技局资助课题 (No .19990 60 14);广东省十五攻关课题 (No .C1180 1)~~

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将编码人组织激肽释放酶成熟蛋白的基因片段扩增并分别克隆到原核表达载体pET28(b)及分泌型表达载体pET20(b)中,使其C端融合6×His Tag序列.转化不同受体菌,IPTG诱导表达后利用SDS-PAGE、免疫印记等方法对重组蛋白进行分析.在6株基因工程菌株中,均表达出分子量约30 kD的激肽释放酶融合蛋白,其中激肽释放酶在pET28载体中的表达水平高于pET20载体.pET28和pET20载体表达的重组激肽释放酶蛋白分别占菌体总蛋白约26%和10%.Western 印迹分析表明,目的蛋白

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