金黄色葡萄球菌肠毒素A的基因克隆、表达及活性试验

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利用PCR从金黄色葡萄球菌标准株(Staphylococcus aureus, ATCC13565)中克隆了金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)的基因,序列测定结果与报道完全一致.构建了表达载体pET-SEA并获得高效表达,重组蛋白(rSEA)在37℃诱导时以包涵体形式存在,降低温度则出现可溶表达,可溶性rSEA占总rSEA的55%.可溶性rSEA经Ni2+亲和层析纯化,达电泳纯.通过同源模建对rSEA对SEA进行结构比较,结果表明尽管rSEA比野生型SEA多了9个氨基酸但其结构并没有明显的变化.单核细胞增殖
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