【摘 要】
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将香蕉内生拮抗细菌KKWB-5的几丁质酶在大肠杆菌中的表达,旨在检测该酶对香蕉枯萎病病原菌4号小种的抗性。PCR扩增该基因连入大肠杆菌表达载体pET22b,导入大肠杆菌BL21（DE3）,IP
【机 构】
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国热带农业科学院热带生物技术研究所,中国热带农业科学院香料饮料研究所,广西壮族自治区玉林市林业科学研究所,中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
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将香蕉内生拮抗细菌KKWB-5的几丁质酶在大肠杆菌中的表达,旨在检测该酶对香蕉枯萎病病原菌4号小种的抗性。PCR扩增该基因连入大肠杆菌表达载体pET22b,导入大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导重组菌株,SDS-PAGE分析目的蛋白的表达,对目的蛋白进行纯化,并将纯化后的目的蛋白复性,对复性产物进行水解几丁质活性和拮抗香蕉枯萎病活性的分析。SDS-PAGE分析表明目的蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式大量表达,经变性Ni2＋柱纯化得到了高纯度的重组蛋白,表达量达293 mg/L;稀释和透析2种复性方法中
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