庆大霉素耐药基因探针的构建

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本文从致痛性大肠杆菌的pEFM2质粒出发,克隆获得重组质粒pBY101,绘制了pBY101的PstⅠ、EcoRⅠ及PvuⅡ的限制性酶切物理图谱,确定Gm耐药基因在8.9kb的pstⅠ—1片段上。用EcoRⅠ酶解pBY101,再连接,次级克隆获得重组质粒pBY102。确证pBY102的4.9kb PstⅠ—EcoRⅠ片段含有编码Gm耐药基因。采用低熔点琉脂糖挖块法回收4.9kb片段,以生物素-7-dAT标记之,并作为探针,以菌落原位杂交珐检测106株Gm耐药性细菌,而且证明本研究构建的Gm—DNA探针与国外
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