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摘要：白细胞分类计数方法（DLC）包括手工法白细胞分类计数、血细胞仪三分群法白细胞分类计数、血细胞仪五分类法白细胞分类计数的操作方法及临床意义进行分析。白细胞分类计数（DLC）主要用于血液造血系疾病、感染性疾病、过敏性和嗜酸细胞增多性疾病诊断、辅助诊断和筛查，非特异性防御功能和感染性疾病预后评价。
关键词：白细胞分类计数；临床意义
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1672-8602（2015）06-0116-01
白细胞分类计数是把血液制成薄血涂片，按照形态特征分类计数白细胞，得出相对比值（百分率），以观察数量、形态和质量的变化，对疾病有辅助诊断意义[1]。
1标本来源
均为我院门诊患者及健康体检者50例，其男27例，女23例，年龄最小4岁，最大63岁。
2 计数方法
2.1手工法白细胞分类计数
2.1.1标本采集 可使用毛细血管采血法所取的样本或静脉血EDTA·K2抗凝样本。
2.1.2试剂 瑞氏染液。
2.1.3操作 将血液滴加在洁净的玻片上，用推片将其推成薄血涂片。自然干燥后用蜡笔在血涂片两头划线以防染液溢出，然后将血涂片平放在染色架上。加瑞氏染液于血涂片上，使之覆盖整个血涂片，固定0.5～1min。滴加等量的缓冲液与染液混匀，染色5～10min。用清水冲去染液，待自然干燥后或用吸水纸吸干即可镜检。
2.1.4参考值 中性粒细胞，杆状核0.01～0.05（1%～5%）分叶核0.50～0.70（50%～70%）。嗜酸性粒细胞0.005～0.05（0.5%～5%）。嗜碱性粒细胞0～0.01（0%～1%）。淋巴细胞0.20～0.40（20%～40%）。单核细胞0.03～0.08（3%～8%）。
2.2血细胞仪三分群法白细胞分类计数
2.2.1标本采集 静脉血EDTA·K2抗凝样本1～2ml。
2.2.2试剂操作 根据仪器不同使用其配套试剂。按仪器操作说明书进行操作。
2.2.3参考值 仪器的报告方式为小细胞、中间细胞及大细胞。小-细胞代表淋巴细胞，中间细胞包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胸及在病理情况下出现的原始及幼稚细胞，大细胞代表中性分叶核以及杆状核和晚幼粒细胞[2]。小细胞群（1.0～3.3）×109/L。中间细胞群（0.2～0.，7）×109/L。大细胞群 （1.8～6.4）×109/L。
2.3血细胞仪五分类法白细胞分类计数
2.3.1标本采集 静脉血EDTA·K2抗凝样本1～2ml。
2.3.2试剂方法 根据仪器不同使用其配套试剂。操作按仪器操作说明书进行操作。
2.3.3参考值 五分类法白细胞分类计数的报告方式同手工法，有淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、中性粒细胞，故参考范围如手工法白细胞分类。虽然仪器法白细胞五分类采用了多种技术来保证结果的准确性，但由于仪器是依靠细胞的各种物理化学特性来进行细胞分类，与手工方法利用细胞的形态学特征进行分类不同，故在各种病理情况下准确性不如手工方法。手工方法仍然是白细胞分类计数的金标准。
3 白细胞分类计数的意义
3.1中性粒细胞 具有吞噬和激活补体功能，能吞噬细菌和组织细胞碎片，激活的补体成分（C3a、C5a、C567）具有粒细胞趋化作用。
3.1.1增多 ①反应性增多 见于：a.感染，细菌、病毒、真菌、螺旋体、立克次体、寄生虫，特别是化脓性细菌全身性或严重局部感染如败血症、肺炎、脑膜炎、阑尾炎、急性肾盂炎或肾盂肾炎、丹毒、蜂窝组织炎等。b.炎症，化学性如腐蚀性或刺激性化学品损伤、急性胰腺炎、化学性腹膜炎；免疫性如风湿热、类风湿性关节炎、结节性动脉周围炎、脉管炎等。c.急性中毒，化学品或药物中毒，自身代谢性中毒如尿毒症、酮症酸中毒或乳酸性酸中毒。d.急性失血，尤以内脏出血如肝、脾、宫外孕破裂出血；1～2小时开始升高，2～5小时达高峰。e.组织损伤或坏死，如心、肺、肾、脑等脏器梗死，肌肉挫伤、大手术后。f.排异反应。g.恶性肿瘤，尤其合并感染、坏死或骨髓转移时。②肿瘤性增多 见于骨髓增生性疾病如白血病特别是慢性粒细胞白血病、骨髓纤维化、原发性血小板增多症。
3.1.2减少 ①感染 某些病毒或杆菌感染如流感、伤寒、副伤寒、布鲁菌病，机体反应性降低时的严重感染。②造血功能障碍 缺乏造血组织如再生障碍性贫血、缺乏造血原料如巨幼细胞性贫血。③骨髓病 非白血性白血病、恶性组织细胞病、肿瘤骨轉移、苯中毒、辐射损伤。④破坏过多 自身抗体如免疫性粒细胞减少症、脾功能亢进症等。⑤药物 多种抗肿瘤药物、氯霉素、头孢菌素、磺胺类、奎诺酮类、万古霉素、磺脲类、氨基比林、非那西汀、保太松、硫氧嘧啶和甲巯咪唑类、氯丙嗪、奎宁等药物使用。⑥特发性粒细胞减少症、Felty综合征。
3.2嗜酸性粒细胞 与过敏反应密切相关，受嗜酸细胞趋化因子调节，吞噬免疫复合物和异体蛋白。
3.2.1增多 ①变态反应性疾病，如支气管哮喘、血管神经性水肿、血清病、荨麻疹、药物过敏反应。②寄生虫病，尤其是肠道外感染如华支睾吸虫、血吸虫、肺吸虫、丝虫、包囊虫病。③某些皮肤病，如湿疹、剥脱性皮炎、天疱疮、银屑病等。④肿瘤性疾病，如肿瘤转移坏死时、肺癌、恶性淋巴瘤、慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症[3]。⑤内分泌疾病，如垂体前叶功能减退症、肾上腺皮质功能减退症。⑥酸细胞浸润性疾病，如嗜酸细胞增多综合征、伴有肺浸润的嗜酸细胞增多症如L0f. fler综合征、嗜酸细胞性肺炎、热带嗜酸细胞增多症以及嗜酸细胞性心内膜炎、嗜酸细胞性肉芽肿等。⑦某些感染性疾病，如猩红热、传染病恢复期。⑧某些结缔组织病，如皮肌炎、结节性动脉周围炎。 3.2.2减少 见于急性严重感染如伤寒、肺炎、败血症，各种急性应激如创伤、大手术后，皮质醇增多症或皮质激素治疗，巨幼细胞性贫血等。
3.3嗜碱性粒细胞 表面有IgE的Fc受体，与IgE结合即被致敏，再受相应抗原攻击时发生颗粒释放反应，颗粒含有组胺、慢反应物、肝素、嗜酸细胞趋化因子、血小板活化因子。
3.3.1增多 見于骨髓增殖性疾病如慢性粒细胞白血病、骨髓纤维化，也见于慢性溶血、脾切除术后、淋巴瘤、骨髓转移癌、铅中毒、过敏反应。
3.3.2减少 未见有临床意义。
3.4淋巴细胞 免疫细胞，合成和释放淋巴因子，参与细胞免疫和体液免疫。
3.4.1增多 ①生理性增多，6岁前儿童期伴随免疫功能成熟过程。②感染，病毒感染如麻疹、风疹、水痘、流行性腮腺炎、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、流行性出血热等；细菌感染如百日咳、结核病、布鲁菌病；螺旋体感染如梅毒。病毒感染可见胞体大、核不规则、胞浆丰富或泡沫样的异型淋巴细胞。异型淋巴细胞增多有时也见于药物过敏、血液透析或体外循环。③急性传染病恢复期。④自身免疫性疾病、器官移植排异反应前。⑤淋巴细胞白血病、淋巴瘤。
3.4.2减少 主要见于皮质醇或烷化剂治疗，辐射损伤、免疫缺陷综合征、先天性免疫球蛋白缺乏症。
3.5单核细胞 吞噬细胞，具有吞噬细菌、清除坏死细胞和异物、向T细胞传递免疫信息功能。
3.5.1增多 ①病毒、立克次体感染，如麻疹、水痘、风疹、传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、斑疹伤寒。②慢性细菌、螺旋体或寄生虫感染，如结核病、麻风病、亚急性细菌性心内膜炎（SBE）、梅毒、疟疾、黑热病等。③急性传染病或急性感染恢复期。④恶性淋巴瘤、恶性组织细胞病、单核细胞白血病。
3.5.2减少 未见有临床意义。
参考文献
[1] 叶应妩，王毓三，申子瑜，主编.全国临床检验操作规程.第3版.武汉：东南大学出版社，2006：132-133，137-138.
[2] 唐沪强，许凯声，吴敏良，等.库尔特STKS血细胞分析仪对白细胞分类异常提示的可信性[J].临床检验杂志，2000，18（3）：176-177.
[3] 李筱梅，杨玉宝，李承文，等.白细胞分类计数方法学比较[J].检验医学，2004，19（2）：100-103.
关键词：白细胞分类计数；临床意义
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1672-8602（2015）06-0116-01
白细胞分类计数是把血液制成薄血涂片，按照形态特征分类计数白细胞，得出相对比值（百分率），以观察数量、形态和质量的变化，对疾病有辅助诊断意义[1]。
1标本来源
均为我院门诊患者及健康体检者50例，其男27例，女23例，年龄最小4岁，最大63岁。
2 计数方法
2.1手工法白细胞分类计数
2.1.1标本采集 可使用毛细血管采血法所取的样本或静脉血EDTA·K2抗凝样本。
2.1.2试剂 瑞氏染液。
2.1.3操作 将血液滴加在洁净的玻片上，用推片将其推成薄血涂片。自然干燥后用蜡笔在血涂片两头划线以防染液溢出，然后将血涂片平放在染色架上。加瑞氏染液于血涂片上，使之覆盖整个血涂片，固定0.5～1min。滴加等量的缓冲液与染液混匀，染色5～10min。用清水冲去染液，待自然干燥后或用吸水纸吸干即可镜检。
2.1.4参考值 中性粒细胞，杆状核0.01～0.05（1%～5%）分叶核0.50～0.70（50%～70%）。嗜酸性粒细胞0.005～0.05（0.5%～5%）。嗜碱性粒细胞0～0.01（0%～1%）。淋巴细胞0.20～0.40（20%～40%）。单核细胞0.03～0.08（3%～8%）。
2.2血细胞仪三分群法白细胞分类计数
2.2.1标本采集 静脉血EDTA·K2抗凝样本1～2ml。
2.2.2试剂操作 根据仪器不同使用其配套试剂。按仪器操作说明书进行操作。
2.2.3参考值 仪器的报告方式为小细胞、中间细胞及大细胞。小-细胞代表淋巴细胞，中间细胞包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胸及在病理情况下出现的原始及幼稚细胞，大细胞代表中性分叶核以及杆状核和晚幼粒细胞[2]。小细胞群（1.0～3.3）×109/L。中间细胞群（0.2～0.，7）×109/L。大细胞群 （1.8～6.4）×109/L。
2.3血细胞仪五分类法白细胞分类计数
2.3.1标本采集 静脉血EDTA·K2抗凝样本1～2ml。
2.3.2试剂方法 根据仪器不同使用其配套试剂。操作按仪器操作说明书进行操作。
2.3.3参考值 五分类法白细胞分类计数的报告方式同手工法，有淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、中性粒细胞，故参考范围如手工法白细胞分类。虽然仪器法白细胞五分类采用了多种技术来保证结果的准确性，但由于仪器是依靠细胞的各种物理化学特性来进行细胞分类，与手工方法利用细胞的形态学特征进行分类不同，故在各种病理情况下准确性不如手工方法。手工方法仍然是白细胞分类计数的金标准。
3 白细胞分类计数的意义
3.1中性粒细胞 具有吞噬和激活补体功能，能吞噬细菌和组织细胞碎片，激活的补体成分（C3a、C5a、C567）具有粒细胞趋化作用。
3.1.1增多 ①反应性增多 见于：a.感染，细菌、病毒、真菌、螺旋体、立克次体、寄生虫，特别是化脓性细菌全身性或严重局部感染如败血症、肺炎、脑膜炎、阑尾炎、急性肾盂炎或肾盂肾炎、丹毒、蜂窝组织炎等。b.炎症，化学性如腐蚀性或刺激性化学品损伤、急性胰腺炎、化学性腹膜炎；免疫性如风湿热、类风湿性关节炎、结节性动脉周围炎、脉管炎等。c.急性中毒，化学品或药物中毒，自身代谢性中毒如尿毒症、酮症酸中毒或乳酸性酸中毒。d.急性失血，尤以内脏出血如肝、脾、宫外孕破裂出血；1～2小时开始升高，2～5小时达高峰。e.组织损伤或坏死，如心、肺、肾、脑等脏器梗死，肌肉挫伤、大手术后。f.排异反应。g.恶性肿瘤，尤其合并感染、坏死或骨髓转移时。②肿瘤性增多 见于骨髓增生性疾病如白血病特别是慢性粒细胞白血病、骨髓纤维化、原发性血小板增多症。
3.1.2减少 ①感染 某些病毒或杆菌感染如流感、伤寒、副伤寒、布鲁菌病，机体反应性降低时的严重感染。②造血功能障碍 缺乏造血组织如再生障碍性贫血、缺乏造血原料如巨幼细胞性贫血。③骨髓病 非白血性白血病、恶性组织细胞病、肿瘤骨轉移、苯中毒、辐射损伤。④破坏过多 自身抗体如免疫性粒细胞减少症、脾功能亢进症等。⑤药物 多种抗肿瘤药物、氯霉素、头孢菌素、磺胺类、奎诺酮类、万古霉素、磺脲类、氨基比林、非那西汀、保太松、硫氧嘧啶和甲巯咪唑类、氯丙嗪、奎宁等药物使用。⑥特发性粒细胞减少症、Felty综合征。
3.2嗜酸性粒细胞 与过敏反应密切相关，受嗜酸细胞趋化因子调节，吞噬免疫复合物和异体蛋白。
3.2.1增多 ①变态反应性疾病，如支气管哮喘、血管神经性水肿、血清病、荨麻疹、药物过敏反应。②寄生虫病，尤其是肠道外感染如华支睾吸虫、血吸虫、肺吸虫、丝虫、包囊虫病。③某些皮肤病，如湿疹、剥脱性皮炎、天疱疮、银屑病等。④肿瘤性疾病，如肿瘤转移坏死时、肺癌、恶性淋巴瘤、慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症[3]。⑤内分泌疾病，如垂体前叶功能减退症、肾上腺皮质功能减退症。⑥酸细胞浸润性疾病，如嗜酸细胞增多综合征、伴有肺浸润的嗜酸细胞增多症如L0f. fler综合征、嗜酸细胞性肺炎、热带嗜酸细胞增多症以及嗜酸细胞性心内膜炎、嗜酸细胞性肉芽肿等。⑦某些感染性疾病，如猩红热、传染病恢复期。⑧某些结缔组织病，如皮肌炎、结节性动脉周围炎。 3.2.2减少 见于急性严重感染如伤寒、肺炎、败血症，各种急性应激如创伤、大手术后，皮质醇增多症或皮质激素治疗，巨幼细胞性贫血等。
3.3嗜碱性粒细胞 表面有IgE的Fc受体，与IgE结合即被致敏，再受相应抗原攻击时发生颗粒释放反应，颗粒含有组胺、慢反应物、肝素、嗜酸细胞趋化因子、血小板活化因子。
3.3.1增多 見于骨髓增殖性疾病如慢性粒细胞白血病、骨髓纤维化，也见于慢性溶血、脾切除术后、淋巴瘤、骨髓转移癌、铅中毒、过敏反应。
3.3.2减少 未见有临床意义。
3.4淋巴细胞 免疫细胞，合成和释放淋巴因子，参与细胞免疫和体液免疫。
3.4.1增多 ①生理性增多，6岁前儿童期伴随免疫功能成熟过程。②感染，病毒感染如麻疹、风疹、水痘、流行性腮腺炎、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、流行性出血热等；细菌感染如百日咳、结核病、布鲁菌病；螺旋体感染如梅毒。病毒感染可见胞体大、核不规则、胞浆丰富或泡沫样的异型淋巴细胞。异型淋巴细胞增多有时也见于药物过敏、血液透析或体外循环。③急性传染病恢复期。④自身免疫性疾病、器官移植排异反应前。⑤淋巴细胞白血病、淋巴瘤。
3.4.2减少 主要见于皮质醇或烷化剂治疗，辐射损伤、免疫缺陷综合征、先天性免疫球蛋白缺乏症。
3.5单核细胞 吞噬细胞，具有吞噬细菌、清除坏死细胞和异物、向T细胞传递免疫信息功能。
3.5.1增多 ①病毒、立克次体感染，如麻疹、水痘、风疹、传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、斑疹伤寒。②慢性细菌、螺旋体或寄生虫感染，如结核病、麻风病、亚急性细菌性心内膜炎（SBE）、梅毒、疟疾、黑热病等。③急性传染病或急性感染恢复期。④恶性淋巴瘤、恶性组织细胞病、单核细胞白血病。
3.5.2减少 未见有临床意义。
参考文献
[1] 叶应妩，王毓三，申子瑜，主编.全国临床检验操作规程.第3版.武汉：东南大学出版社，2006：132-133，137-138.
[2] 唐沪强，许凯声，吴敏良，等.库尔特STKS血细胞分析仪对白细胞分类异常提示的可信性[J].临床检验杂志，2000，18（3）：176-177.
[3] 李筱梅，杨玉宝，李承文，等.白细胞分类计数方法学比较[J].检验医学，2004，19（2）：100-103.