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摘要：利用气相色谱技术检测3个试点牛肉红朱橘及其对照（朱红橘）果实可溶性糖和有机酸含量，结果表明：牛肉红朱橘成熟果皮有机酸和可溶性糖含量极少，主要积累在果肉中；果肉中有机酸以柠檬酸为主，可溶性糖以蔗糖为主；3个试点的不同生态条件下，果实有机酸和可溶性糖含量差异显著，从而导致果实品质的差异；糖分含量随温度的升高而升高，酸含量随温度的下降而减少。通过初步评价3个试点牛肉红朱橘果实糖酸含量差异，为牛肉红朱橘的推广与示范提供一定的参考。
关键词：牛肉红朱橘；不同试点；可溶性糖；有机酸
中图分类号： S666.201文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）01-0255-04
收稿日期：2013-05-28
基金项目：国家现代农业（柑橘）产业技术体系专项（编号：CARS-27）；贵州省农业科学院研究生创新基金[编号：黔农科合（创新基金）2010008]；贵州省科研机构创新能力建设项目（编号：黔科合院所创能[2010]4009）。
作者简介：李文云（1983—），女，湖北襄樊人，硕士，助理研究员，主要从事果树栽培与育种研究。E-mail：gzganju@163.com。
通信作者：李金强，高级农艺师，主要从事柑橘栽培技术研究。E-mail：gzlijinqiang@163.com。牛肉红朱橘是在80多年前从贵州省惠水县涟江河畔11万株朱红橘中选育出的1株红肉突变体，果皮红如牛肉色，果肉呈暗红色（可能是天然杂种），当地群众称之为牛肉红金橘[1]。彭志军等利用AFLP分子标记技术对朱红橘及其实生变异体牛肉红金橘进行了遗传鉴定，结果表明牛肉红金橘与朱红橘在DNA水平上确实存在差异，牛肉红金橘为遗传上稳定的变异体[2]。2011年6月通过贵州省农作物品种审定委员会审定，并正式定名为牛肉红朱橘（审定编号为：黔审果2011004号）[3]。牛肉红朱橘具有果小（单果重仅有 40～60 g）、皮薄、少核或无核、色泽橙红和独特浓香味等优点，是贵州省特色柑橘品种之一。牛肉红朱橘果色鲜艳，符合现代人消费需求，特别吸引消费者，多年来一直有着强劲的市场优势。目前贵州省牛肉红朱橘市场售价为 6～10元/kg，高出其他橘类2～3元/kg。目前，牛肉红朱橘主要集中栽培在贵州省惠水、都匀、沿河、黔西等县市，种植面积约107 hm2（2012年新建果园 67 hm2），投产面积约40 hm2，平均产量为34 kg/株。因为近年来才开始在贵州省推广种植，所以不同生态条件下的牛肉红朱橘果实品质发育研究较少。本研究利用气相色谱技术检测牛肉红朱橘及其对照（朱红橘）果实可溶性糖和有机酸含量，初步评价3个试点果实品质差异，为牛肉红朱橘的推广与示范提供一定的参考。
1材料与方法
1.1材料
牛肉红朱橘及其对照（朱红橘）成熟果实于2010年11月底采自贵州省惠水县、沿河县、都匀市3个试点。以枳壳作砧木，均为成年结果树。选择挂果量相当、生长势基本一致的的6株树，在树冠中下部进行果实采样，每个样品采90个果实。果实从树上采摘后立即带回实验室进行分析。
1.2气象资料
惠水县、沿河县、都匀市基本气象资料参数见表1。
1.3可溶性糖和有机酸含量的測定
可溶性糖和有机酸含量的检测参照顾建芹的方法[4]，利用高效气相色谱（Agilent technologies 7890A）测定不同产地牛肉红朱橘和朱红橘可溶性糖和有机酸含量。气相色谱工作条件为：HP-5色谱柱，分流/不分流进样口温度 270 ℃，检测器温度300 ℃；高纯N2 作载气，流量45 mL/min，H2流量 40 mL/min，空气流量450 mL/min，柱头压 82.74 kPa，进样量 1 μL，分流30 ∶1，分流速率60.1 mL/min，总流速 64.6 mL/min；升温程序：初温130 ℃，以8 ℃/min升至 152 ℃，12 ℃/min升至176 ℃，16 ℃/min升至198 ℃，并以20 ℃/min升至238 ℃，24 ℃/min升至280 ℃，并在280 ℃停留4 min。允许最大温度为325 ℃。
1.4数据分析
应用Excel数据处理软件进行数据的归类处理并绘制柱形图，应用SAS软件在0.05的水平上进行平均数的差异显著性分析（ANOVA）。
2结果与分析
2.1不同试点果皮中可溶性糖含量分析
从表2、图1可以看出，果皮中所检测的3种可溶性糖中，果糖和葡萄糖含量显著高于蔗糖含量。都匀果糖、葡萄糖含量分别是蔗糖的2.36、2.33倍；惠水果糖、葡萄糖含量分别是蔗糖的1.80、1.82倍；沿河果糖、葡萄糖含量均是蔗糖的2.26倍。对照果糖、葡萄糖含量分别是蔗糖的3.08、2.89倍。3个试点中，都匀果糖含量显著高于惠水和沿河，惠水和沿河差异不显著；葡萄糖含量顺序为都匀>惠水>对照>沿河；蔗糖含量沿河显著高于都匀和惠水；总糖含量顺序为都匀>惠水>对照>沿河。
2.2不同试点果皮中有机酸含量分析
从表3、图1可以看出，果皮中所检测的3种有机酸中，3个试点果皮中柠檬酸含量均较低，奎宁酸含量稍高；果皮中有机酸含量顺序为奎宁酸>苹果酸>柠檬酸。都匀和惠水果皮中未检测到柠檬酸，沿河和对照果皮中检测到微量柠檬酸。苹果酸含量顺序为沿河>对照>惠水>都匀；柠檬酸含量顺序为对照>沿河>惠水=都匀；奎宁酸含量顺序为沿河>都匀>对照>惠水；总酸含量顺序为沿河>对照>都匀>惠水。
2.3不同试点果肉中可溶性糖含量分析
从表4、图2可以看出，果肉中所检测的3种可溶性糖中，蔗糖含量显著高于果糖和葡萄糖；3个试点可溶性糖含量顺序均为蔗糖>果糖>葡萄糖。都匀蔗糖含量分别是果糖和葡萄糖的2.24、2.94倍；惠水蔗糖含量分别是果糖和葡萄糖的2.33、2.84倍；沿河蔗糖含量分别是果糖和葡萄糖的243、3.11倍；对照蔗糖含量分别是果糖和葡萄糖的2.08、273倍。3个试点中，惠水果糖、葡萄糖、蔗糖、总糖含量均显著高于都匀、沿河、对照，且果糖、葡萄糖、蔗糖、总糖含量顺序均为惠水>沿河>都匀>对照。 2.4不同试点果肉中有机酸含量分析
从表5、图2可以看出，3个试点有机酸含量顺序均为柠檬酸>苹果酸>奎宁酸，且柠檬酸含量显著高于苹果酸和奎宁酸，且试点间柠檬酸含量差异不显著。苹果酸含量顺序为惠水>都匀>对照>沿河；柠檬酸含量顺序为沿河>都匀>惠水>对照；奎宁酸含量顺序为都匀=惠水=对照>沿河；总酸含量顺序为都匀>惠水>沿河>对照，3个试点含量差异不显著。
3讨论
随着生活水平的提高，人们对果品的风味、营养的要求也越来越高，而柑橘芳香味美，极富营养价值，正是理想的果品。除果汁丰富、酸甜可口外，柑橘还含有丰富的糖类、有机酸、矿物质、纤维素、蛋白质、氨基酸和多种维生素[5]。柑橘果实可溶性糖和有机酸参与糖酵解 、三羧酸循环及糖异生等多项代谢活动[6]，其含量是决定品质好壞的重要指标。牛肉红朱橘成熟果皮有机酸和可溶性糖含量极少，主要积累在果肉中；果肉有机酸中以柠檬酸为主，可溶性糖以蔗糖为主，与前人研究结果[7-10]一致。
柑橘果实品质受土壤、气候、品种特性、病虫害、栽培管理措施等条件的影响，其中气候条件是影响果实品质的主要因素之一。彭良志等研究表明，海拔高度和光、热、水等气象因子对脐橙品质都有明显影响[11]。在一定范围内，果实含酸量随海拔高度的升高而增加，海拔高度影响果实含酸量的主要原因与温度有关。罗世杏等研究也表明：水分、温度等7项因子对桂橙一号果实品质有显著影响[12]。本研究中，3个试点的不同生态条件下，果实有机酸和可溶性糖含量差异显著，从而导致果实品质的差异。通常在一定范围内，糖分含量随温度的升高而升高，酸含量随温度的下降而下降[13]。
本研究通过初步评价3个试点牛肉红朱橘果实糖酸含量的差异，为牛肉红朱橘的推广与示范提供一定的参考。柑橘糖酸含量是多基因控制的数量性状，并受环境条件和栽培管理措施影响[14]，若要准确比较各产地果实品质，需选择更多地区不同生态条件下的果园进行连续3～5 年的果实品质理
化指标的跟踪研究。
参考文献：
[1]谭萍，谭奋勇，王祖泽. 惠水独特优良品种——牛肉红金橘[J]. 江西柑橘科技，1994（2）：26-27.
[2]彭志军，陈守一，蔡永强，等. 朱红橘及其突变体牛肉红金橘的AFLP分析[J]. 西南农业学报，2011，24（1）：225-228.
[3]李文云，陈守一，李金强，等. 牛肉红朱橘采后在贵阳常温贮藏期的品质变化[J]. 贵州农业科学，2011，39（11）：184-186.
[4]顾建芹. 暗柳橙及其突变体红暗柳橙果实发育过程中糖酸组分的变化[D]. 武汉：华中农业大学，2007：1-50.
[5]陈在新，王宜雄，李金秋，等. 湖北公安县柑橘果实品质分析与模糊综合评判[J]. 安徽农业科学，2006，34（18）：4518-4519.
[6]赵淼，吴延军，蒋桂华，等. 柑橘果实有机酸代谢研究进展[J]. 果树学报，2008，25（2）：225-230.
[7]Yamaki Y T. Organic acid in the juice of citrus fruits[J]. Journal of Japan Horticultural Science Society，1989，58（3）：587-594.
[8]Erickson L C. The general physiology of citrus[C]//Reuter W，Batchelor L D，Webber H J. The Citrus Industry. Berkeley：University California，1968，12：86-126.
[9]罗安才，李道高，杨晓红. 柑橘果实有机酸代谢研究进展[J]. 园艺学报，2001，28（增刊）：597-602.
[10]刘永忠，李道高. 脐橙果实发育中糖分积累与蔗糖磷酸合成酶活性研究[J]. 西南农业大学学报，2002，24（4）：340-342.
[11]彭良志，王成秋. 海拔高度和气象因子对脐橙果实品质的影响[J]. 中国南方果树，2000，29（4）：3-4.
[12]罗世杏，陈贵峰，梅正敏，等. “桂橙一号”果实膨大与气象因子的相关性分析[J]. 北方园艺，2012（22）：16-18.
[13]李泽碧，王正银.柑橘品质的影响因素研究[J]. 广西农业科学，2006，37（3）：307-310.
[14]罗安才，杨晓红，邓英毅，等. 柑橘果实发育过程中有机酸含量及相关代谢酶活性的变化[J]. 中国农业科学，2003，36（8）：941-944.李青，谭红，袁鑫，等. 高效液相色谱法测定核桃青皮中胡桃醌的含量[J]. 江苏农业科学，2014，42（1）：259-261.
关键词：牛肉红朱橘；不同试点；可溶性糖；有机酸
中图分类号： S666.201文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）01-0255-04
收稿日期：2013-05-28
基金项目：国家现代农业（柑橘）产业技术体系专项（编号：CARS-27）；贵州省农业科学院研究生创新基金[编号：黔农科合（创新基金）2010008]；贵州省科研机构创新能力建设项目（编号：黔科合院所创能[2010]4009）。
作者简介：李文云（1983—），女，湖北襄樊人，硕士，助理研究员，主要从事果树栽培与育种研究。E-mail：gzganju@163.com。
通信作者：李金强，高级农艺师，主要从事柑橘栽培技术研究。E-mail：gzlijinqiang@163.com。牛肉红朱橘是在80多年前从贵州省惠水县涟江河畔11万株朱红橘中选育出的1株红肉突变体，果皮红如牛肉色，果肉呈暗红色（可能是天然杂种），当地群众称之为牛肉红金橘[1]。彭志军等利用AFLP分子标记技术对朱红橘及其实生变异体牛肉红金橘进行了遗传鉴定，结果表明牛肉红金橘与朱红橘在DNA水平上确实存在差异，牛肉红金橘为遗传上稳定的变异体[2]。2011年6月通过贵州省农作物品种审定委员会审定，并正式定名为牛肉红朱橘（审定编号为：黔审果2011004号）[3]。牛肉红朱橘具有果小（单果重仅有 40～60 g）、皮薄、少核或无核、色泽橙红和独特浓香味等优点，是贵州省特色柑橘品种之一。牛肉红朱橘果色鲜艳，符合现代人消费需求，特别吸引消费者，多年来一直有着强劲的市场优势。目前贵州省牛肉红朱橘市场售价为 6～10元/kg，高出其他橘类2～3元/kg。目前，牛肉红朱橘主要集中栽培在贵州省惠水、都匀、沿河、黔西等县市，种植面积约107 hm2（2012年新建果园 67 hm2），投产面积约40 hm2，平均产量为34 kg/株。因为近年来才开始在贵州省推广种植，所以不同生态条件下的牛肉红朱橘果实品质发育研究较少。本研究利用气相色谱技术检测牛肉红朱橘及其对照（朱红橘）果实可溶性糖和有机酸含量，初步评价3个试点果实品质差异，为牛肉红朱橘的推广与示范提供一定的参考。
1材料与方法
1.1材料
牛肉红朱橘及其对照（朱红橘）成熟果实于2010年11月底采自贵州省惠水县、沿河县、都匀市3个试点。以枳壳作砧木，均为成年结果树。选择挂果量相当、生长势基本一致的的6株树，在树冠中下部进行果实采样，每个样品采90个果实。果实从树上采摘后立即带回实验室进行分析。
1.2气象资料
惠水县、沿河县、都匀市基本气象资料参数见表1。
1.3可溶性糖和有机酸含量的測定
可溶性糖和有机酸含量的检测参照顾建芹的方法[4]，利用高效气相色谱（Agilent technologies 7890A）测定不同产地牛肉红朱橘和朱红橘可溶性糖和有机酸含量。气相色谱工作条件为：HP-5色谱柱，分流/不分流进样口温度 270 ℃，检测器温度300 ℃；高纯N2 作载气，流量45 mL/min，H2流量 40 mL/min，空气流量450 mL/min，柱头压 82.74 kPa，进样量 1 μL，分流30 ∶1，分流速率60.1 mL/min，总流速 64.6 mL/min；升温程序：初温130 ℃，以8 ℃/min升至 152 ℃，12 ℃/min升至176 ℃，16 ℃/min升至198 ℃，并以20 ℃/min升至238 ℃，24 ℃/min升至280 ℃，并在280 ℃停留4 min。允许最大温度为325 ℃。
1.4数据分析
应用Excel数据处理软件进行数据的归类处理并绘制柱形图，应用SAS软件在0.05的水平上进行平均数的差异显著性分析（ANOVA）。
2结果与分析
2.1不同试点果皮中可溶性糖含量分析
从表2、图1可以看出，果皮中所检测的3种可溶性糖中，果糖和葡萄糖含量显著高于蔗糖含量。都匀果糖、葡萄糖含量分别是蔗糖的2.36、2.33倍；惠水果糖、葡萄糖含量分别是蔗糖的1.80、1.82倍；沿河果糖、葡萄糖含量均是蔗糖的2.26倍。对照果糖、葡萄糖含量分别是蔗糖的3.08、2.89倍。3个试点中，都匀果糖含量显著高于惠水和沿河，惠水和沿河差异不显著；葡萄糖含量顺序为都匀>惠水>对照>沿河；蔗糖含量沿河显著高于都匀和惠水；总糖含量顺序为都匀>惠水>对照>沿河。
2.2不同试点果皮中有机酸含量分析
从表3、图1可以看出，果皮中所检测的3种有机酸中，3个试点果皮中柠檬酸含量均较低，奎宁酸含量稍高；果皮中有机酸含量顺序为奎宁酸>苹果酸>柠檬酸。都匀和惠水果皮中未检测到柠檬酸，沿河和对照果皮中检测到微量柠檬酸。苹果酸含量顺序为沿河>对照>惠水>都匀；柠檬酸含量顺序为对照>沿河>惠水=都匀；奎宁酸含量顺序为沿河>都匀>对照>惠水；总酸含量顺序为沿河>对照>都匀>惠水。
2.3不同试点果肉中可溶性糖含量分析
从表4、图2可以看出，果肉中所检测的3种可溶性糖中，蔗糖含量显著高于果糖和葡萄糖；3个试点可溶性糖含量顺序均为蔗糖>果糖>葡萄糖。都匀蔗糖含量分别是果糖和葡萄糖的2.24、2.94倍；惠水蔗糖含量分别是果糖和葡萄糖的2.33、2.84倍；沿河蔗糖含量分别是果糖和葡萄糖的243、3.11倍；对照蔗糖含量分别是果糖和葡萄糖的2.08、273倍。3个试点中，惠水果糖、葡萄糖、蔗糖、总糖含量均显著高于都匀、沿河、对照，且果糖、葡萄糖、蔗糖、总糖含量顺序均为惠水>沿河>都匀>对照。 2.4不同试点果肉中有机酸含量分析
从表5、图2可以看出，3个试点有机酸含量顺序均为柠檬酸>苹果酸>奎宁酸，且柠檬酸含量显著高于苹果酸和奎宁酸，且试点间柠檬酸含量差异不显著。苹果酸含量顺序为惠水>都匀>对照>沿河；柠檬酸含量顺序为沿河>都匀>惠水>对照；奎宁酸含量顺序为都匀=惠水=对照>沿河；总酸含量顺序为都匀>惠水>沿河>对照，3个试点含量差异不显著。
3讨论
随着生活水平的提高，人们对果品的风味、营养的要求也越来越高，而柑橘芳香味美，极富营养价值，正是理想的果品。除果汁丰富、酸甜可口外，柑橘还含有丰富的糖类、有机酸、矿物质、纤维素、蛋白质、氨基酸和多种维生素[5]。柑橘果实可溶性糖和有机酸参与糖酵解 、三羧酸循环及糖异生等多项代谢活动[6]，其含量是决定品质好壞的重要指标。牛肉红朱橘成熟果皮有机酸和可溶性糖含量极少，主要积累在果肉中；果肉有机酸中以柠檬酸为主，可溶性糖以蔗糖为主，与前人研究结果[7-10]一致。
柑橘果实品质受土壤、气候、品种特性、病虫害、栽培管理措施等条件的影响，其中气候条件是影响果实品质的主要因素之一。彭良志等研究表明，海拔高度和光、热、水等气象因子对脐橙品质都有明显影响[11]。在一定范围内，果实含酸量随海拔高度的升高而增加，海拔高度影响果实含酸量的主要原因与温度有关。罗世杏等研究也表明：水分、温度等7项因子对桂橙一号果实品质有显著影响[12]。本研究中，3个试点的不同生态条件下，果实有机酸和可溶性糖含量差异显著，从而导致果实品质的差异。通常在一定范围内，糖分含量随温度的升高而升高，酸含量随温度的下降而下降[13]。
本研究通过初步评价3个试点牛肉红朱橘果实糖酸含量的差异，为牛肉红朱橘的推广与示范提供一定的参考。柑橘糖酸含量是多基因控制的数量性状，并受环境条件和栽培管理措施影响[14]，若要准确比较各产地果实品质，需选择更多地区不同生态条件下的果园进行连续3～5 年的果实品质理
化指标的跟踪研究。
参考文献：
[1]谭萍，谭奋勇，王祖泽. 惠水独特优良品种——牛肉红金橘[J]. 江西柑橘科技，1994（2）：26-27.
[2]彭志军，陈守一，蔡永强，等. 朱红橘及其突变体牛肉红金橘的AFLP分析[J]. 西南农业学报，2011，24（1）：225-228.
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[5]陈在新，王宜雄，李金秋，等. 湖北公安县柑橘果实品质分析与模糊综合评判[J]. 安徽农业科学，2006，34（18）：4518-4519.
[6]赵淼，吴延军，蒋桂华，等. 柑橘果实有机酸代谢研究进展[J]. 果树学报，2008，25（2）：225-230.
[7]Yamaki Y T. Organic acid in the juice of citrus fruits[J]. Journal of Japan Horticultural Science Society，1989，58（3）：587-594.
[8]Erickson L C. The general physiology of citrus[C]//Reuter W，Batchelor L D，Webber H J. The Citrus Industry. Berkeley：University California，1968，12：86-126.
[9]罗安才，李道高，杨晓红. 柑橘果实有机酸代谢研究进展[J]. 园艺学报，2001，28（增刊）：597-602.
[10]刘永忠，李道高. 脐橙果实发育中糖分积累与蔗糖磷酸合成酶活性研究[J]. 西南农业大学学报，2002，24（4）：340-342.
[11]彭良志，王成秋. 海拔高度和气象因子对脐橙果实品质的影响[J]. 中国南方果树，2000，29（4）：3-4.
[12]罗世杏，陈贵峰，梅正敏，等. “桂橙一号”果实膨大与气象因子的相关性分析[J]. 北方园艺，2012（22）：16-18.
[13]李泽碧，王正银.柑橘品质的影响因素研究[J]. 广西农业科学，2006，37（3）：307-310.
[14]罗安才，杨晓红，邓英毅，等. 柑橘果实发育过程中有机酸含量及相关代谢酶活性的变化[J]. 中国农业科学，2003，36（8）：941-944.李青，谭红，袁鑫，等. 高效液相色谱法测定核桃青皮中胡桃醌的含量[J]. 江苏农业科学，2014，42（1）：259-261.