C端融合RGD三肽的重组L-门冬酰胺酶基因克隆、表达和对血液系统的影响

来源 :药物生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wxcheng823

【摘要】

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利用加端PCR技术构建asnB-RGD工程菌,获得C末端带有RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸,Arg-Gly-Asp)三肽的门冬酰胺酶(AnsB-RGD),以改进L-门冬酰胺酶的作用.以pUA18为模板,利用pUC1

【作者】

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曹荣月钱之玉余霁王学军李亚君徐群为刘景晶

【机构】

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中国药科大学,江苏省递药系统重点实验室

【出处】

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药物生物技术

【发表日期】

：

2003年6期

【关键词】

：

L-门冬酰胺酶 PCR技术 DNA测序 RGD三肽 L-asparaginase Polymerase chain reaction DNA sequenc

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利用加端PCR技术构建asnB-RGD工程菌,获得C末端带有RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸,Arg-Gly-Asp)三肽的门冬酰胺酶(AnsB-RGD),以改进L-门冬酰胺酶的作用.以pUA18为模板,利用pUC18上游普适引物和根据L-门冬酰胺酶Ⅱ基因(ansB)C末端下游序列设计的引物来扩增目标基因.将目标基因连于pMD18-T载体,转化宿主菌JM109,筛选出的阳性克隆通过HindⅢ、NcoⅠ双酶切下目标基因连到含T7启动子的高效表达载体pET28a上,再转化BL21宿主菌.高效表达的工程菌摇瓶发

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