p75真核表达载体的构建及其在PC-3细胞中的表达

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目的:构建人神经生长因子低亲和力受体p75真核表达质粒,并在前列腺癌细胞PC-3中表达.方法:运用RT-PCR技术从人脑胶质细胞瘤组织中分离扩增编码人p75完整基因,与pcDNA载体重组,并通过酶切和测序鉴定;用脂质体介导法将重组质粒转染到PC-3细胞中,经G418筛选后,用RT-PCR、间接免疫荧光化学和细胞免疫组织化学法在转录和翻译两个水平上检测表达产物.结果:酶切和测序证实所获得的重组质粒包含p75完整基因;在转染pcDNA3.1(+)-p75的 PC-3细胞中检测到转录和翻译产物.结论:成功地构建
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