mIL-4昆虫表达载体pIZT／V5-His的构建及其高效表达

来源 :吉林大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：scetc203

【摘要】

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目的：构建昆虫表达载体pIZT／V5-His的基础上，建立能稳定高效表达mIL-4的昆虫细胞系。方法：PCR体外扩增mIL-4，将目的基因mIL-4和昆虫表达载体pIZT／V5-His用EcoRI和XbaI做双酶切，通过T

【作者】

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孙延波李菁华史红艳

【机构】

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吉林大学基础医学院病原生物学教研室

【出处】

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吉林大学学报：医学版

【发表日期】

：

2006年2期

【关键词】

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白细胞介素4 昆虫细胞SF9 基因表达遗传载体 interleukin-4 insect cell Sf9 gene expression geneti

【基金项目】

：

美国国立卫生研究院资助课题（NIH48568）

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目的：构建昆虫表达载体pIZT／V5-His的基础上，建立能稳定高效表达mIL-4的昆虫细胞系。方法：PCR体外扩增mIL-4，将目的基因mIL-4和昆虫表达载体pIZT／V5-His用EcoRI和XbaI做双酶切，通过T4DNA连接酶构建成含mIL-4目的基因的表达载体pIZT／V5一His—IL4。采用脂质体法将重组DNA转染到生长良好的昆虫细胞Sf9中。转染后的第3天，用ELISA方法检测转染细胞的培养上清中分泌型蛋白mIL-4的含量。结果：转染后的昆虫细胞Sf9能产生大量的mIL-4，含量可达1m

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