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研究Numb基因对人肾癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其相关机制。
方法选取人肾癌细胞786-O为研究对象,采用Numb-ORF表达质粒转染细胞为实验组,设置阴性对照组及空白对照组。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹技术检测各组中Numb和基质金属蛋白酶9 (MMP-9)的表达情况,采用细胞划痕实验和Transwell小室法分别检测细胞的迁移和侵袭能力。
结果实验组中Numb的相对表达水平为36.13±8.33,阴性对照组为2.51±0.27,空白对照组为2.87±0.21,差异有统计学意义(P=0.00 );实验组MMP-9相对表达水平为2.36±0.29,阴性对照组为8.73±0.91,空白对照组为8.99±0.78,差异有统计学意义(P=0.00)。划痕实验中,12 h划痕修复比为:实验组0.53±0.06,阴性对照组0.73±0.09,空白对照组0.75±0.08,差异有统计学意义(P=0.02)。侵袭实验中,实验组的穿膜细胞数为(31.40±5.96)个,少于阴性对照组的(126.93±13.61)个和空白对照组的(131.87±15.42)个,差异有统计学意义(P=0.00)。
结论上调Numb基因可以降低人肾癌细胞786-O的侵袭和迁移能力,该作用可能是通过Numb负性调节MMP-9实现的。