目的 研究CD40配体(CD40L，CD154)对CD40阴性肺癌细胞系转染CD40 cDNA后(即CD40高表达细胞系)的调节作用，评价CD40作为治疗靶抗原的潜能。方法 通过流式细胞术筛选CD40阴性细胞系，即GLC-82细胞。以3D5细胞为模板，以pCDNA3为载体，通过基因克隆技术制备CD40 cDNA并转染到GLC-82细胞中，建立CD40高表达细胞系，即GLC-82/CD40。在细胞培养液中加入0.1μg/ml CD40L，通过流式细胞术和MTT试验检测CD40L对细胞表型、细胞生长、细胞周期及凋亡的影响。结果 Western蛋白印迹检测、限制性酶切电泳、DNA测序和流式细胞仪测定均证明了CD40 cDNA转染成功，转染后细胞的CD40表达率高达95.9%。CD40L与CD40作用后，使GLC-82/CD40细胞系上MHC-1、ICAM-1和Fas分子的表达增强，EGFR表达减弱。细胞生长受到抑制，第5天受抑最明显，受抑率为30%，但无周期特异性变化。CD40L停用48h后，各种指标的变化有所恢复。CD40L对原有高表达CD40的Calu-3肺癌细胞上述指标的影响较GLC-82/CD40更明显，而对不表达CD40的GLC82细胞无明显影响。所有肺癌细胞系均未出现细胞凋亡。结论 CD40L对转染CD40 cDNA后CD40高表达肺癌细胞系具有免疫导向治疗的潜能。