【摘 要】
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目的探讨人破骨细胞中非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶11(PTPN11)的表达及其作用机制。方法收集不同年龄组健康志愿者(青年组28例：20～45岁；中年组33例：46～60岁；老年组31例：61～80岁)外周血单个核细胞，诱导成破骨细胞。将细胞分为对照组、空白组、Adv-PTPN11转染组。利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PTPN11、低氧诱导因子-1α(HIF-1α) mRNA的表
【机 构】
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目的探讨人破骨细胞中非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶11(PTPN11)的表达及其作用机制。
方法收集不同年龄组健康志愿者(青年组28例：20～45岁；中年组33例：46～60岁；老年组31例：61～80岁)外周血单个核细胞，诱导成破骨细胞。将细胞分为对照组、空白组、Adv-PTPN11转染组。利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PTPN11、低氧诱导因子-1α(HIF-1α) mRNA的表达，利用Western blot检测PTPN11、HIF-1α蛋白的表达，噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活，利用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、白细胞介素(IL)-6、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、B细胞激活因子(BAFF)分泌量，同时检测骨吸收。
结果与青年组(mRNA：4.468±1.441，蛋白：1.000±0.055)和中年组(mRNA：4.673±1.469，蛋白：1.021±0.076)比较，老年组破骨细胞中PTPN11 mRNA(7.510±1.941)和蛋白(1.556±0.123)表达明显上升。破骨细胞转染Adv-PTPN11后24、48、72 h存活率比较差异无统计学意义。Adv-PTPN11转染组HIF-1α mRNA和蛋白的表达量明显高于对照组和空白组。Adv-PTPN11转染组SDF-1[(94.2±10.3) ng/ml]、IL-6[(25.1±3.2) ng/ml]、MIP-1α[(31.2±3.9) ng/ml]、BAFF[(39.8±3.7) ng/ml]表达量增高，同时骨陷窝数量和面积也增加。HIF-1α抑制剂YC-1处理则抑制破骨细胞中SDF-1[(73.8±7.5) ng/ml]、IL-6[(17.9±2.5) ng/ml]、MIP-1α[(19.8±1.6) ng/ml]、BAFF[(23.5±2.7) ng/ml]表达及骨吸收。
结论PTPN11可通过HIF-1α影响破骨细胞细胞因子表达和骨吸收。
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