探讨调控Hippo信号通路在体内环境中促进间充质干细胞（MSC）修复急性呼吸窘迫综合征（ARDS）肺损伤的作用机制。
方法通过慢病毒载体转染构建低表达大肿瘤抑制因子2（LATS2）的小鼠骨髓MSC（mMSCs）细胞株。按照随机数字表法将6～8周龄雄性C57BL/6小鼠分为4组，每组36只。通过气道内注入2 g/L脂多糖（LPS）50 μL制备ARDS动物模型（ARDS组）；生理盐水（NS）对照组注入等体积NS。制模后4 h，通过气道移植5×104个含空干扰病毒转染的mMSCs（MSC-shcontrol组）或低表达LATS2的mMSCs（MSC-shLATS2组）；NS对照组和ARDS组则注入等量磷酸盐缓冲液（PBS）。制模后3、7、14 d分别处死小鼠并收集肺组织及支气管肺泡灌洗液（BALF），采用近红外荧光成像、免疫荧光染色及蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）评估mMSCs在肺组织的存留及向Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）分化情况；测定肺组织湿重/体重比值（LWW/BW）及BALF中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）含量以评价mMSCs对肺水肿的改善效应；用Western Blot检测肺上皮紧密连接蛋白闭合蛋白（Occludin）的表达以反映mMSCs对上皮细胞通透性的影响；用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测BALF中白细胞介素（IL-1β、IL-6、IL-10）水平以评估mMSCs对肺组织炎症反应的影响；对肺组织分别进行苏木素-伊红（HE）染色及改良Masson染色并评分以评估mMSCs对肺损伤的修复作用及对肺纤维化的影响。
结果MSC-shLATS2组3 d小鼠离体肺荧光图像信号强度即明显高于MSC-shcontrol组（荧光强度：0.039±0.005比0.017±0.002，P<0.05），肺组织内绿色荧光蛋白（GFP）阳性细胞数也明显高于MSC-shcontrol组（个/HP：29.65±6.98比17.50±4.58，P<0.05），但均随时间延长而递减；mMSCs向AECⅡ的分化比例也更高〔（64.12±15.29）%比（19.64±3.71）%，P<0.05〕。与NS对照组比较，ARDS组表面活性蛋白（SPC）、Occludin蛋白表达水平明显降低，LWW/BW比值及BALF中TP、ALB和炎性因子水平明显升高；肺组织可见广泛的肺泡及间质水肿、出血，弥漫性炎性细胞浸润，肺损伤评分显著增高；肺泡间隔和肺泡腔内可见明显的胶原纤维沉积，肺纤维化评分显著增高。与ARDS组比较，MSC-shcontrol组和MSC-shLATS2组14 d SPC、Occludin蛋白表达水平明显升高（SPC/β-actin：0.51±0.12、0.68±0.10比0.27±0.08，Occludin/β-actin：0.49±0.19、0.79±0.11比0.25±0.08，均P<0.05），3 d时BALF中TP、ALB、IL-1β、IL-6水平明显降低〔TP（g/L）：8.08±1.72、5.12±0.87比12.55±2.09，ALB（g/L）：0.71±0.21、0.44±0.18比1.18±0.29，IL-1β（ng/L）：99.26±14.32、60.11±8.58比161.86±25.17，IL-6（ng/L）：145.54±13.29、101.74±11.55比258.79±27.88，均P<0.05〕，IL-10水平明显升高（ng/L：190.83±22.61、316.65±37.88，均P<0.05），且MSC-shLATS2组各指标较MSC-shcontrol组升高或降低更为显著（均P<0.05）；MSC-shLATS2组LWW/BW比值明显低于ARDS组和MSC-shcontrol组（mg/g：9.85±1.51比16.78±1.92、14.88±1.74，均P<0.05）。
结论通过低表达LATS2抑制Hippo信号通路能促进mMSCs在ARDS小鼠肺组织内的存留及向AECⅡ细胞分化，改善肺水肿及肺泡上皮通透性，调控肺内炎症反应，减轻肺组织病理损伤及纤维化改变。