广藿香悬浮细胞原生质体的分离与纯化研究

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目的探讨广藿香悬浮细胞原生质体分离与纯化过程中的影响因素。方法以广藿香悬浮细胞为材料,采用酶解法分离原生质体,结合过滤法和离心沉降法进行纯化,测定原生质体产量和活力,考察酶液组合、酶解时间、渗透压调节剂甘露醇浓度、悬浮细胞继代培养时间、不同孔径滤网和离心条件的影响。结果将继代培养9~14 d的悬浮细胞在质量浓度分别为1.5%纤维素酶、0.8%果胶酶、0.5%半纤维素酶,渗透压调节剂甘露醇浓度为0.4 mol/L条件下,避光振荡酶解12 h,可分离出大量原生质体,依次经40→100→200目滤网过滤,600
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