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摘 要:随着我国社会经济的发展,我国的科学技术水平不断地得到提升,并且在科学技术的科研方面也取得了一定的成就,其中尤其是对于食品安全检测的技术水平越来越高,同时由于为了进一步的提高食品安全,相关的部门果断采用PCR技术,因此,文章就关于PCR技术在视屏问生物检测中的应用进行探讨,进而保证食品食用的安全性。
关键词:PCR技术 食品 微生物检测 应用
一、PCR技术的概述
1.PCR技术的概述。随着我国科学技术的发展,我国的食品安全检测采用了PCR技术,有效的提高了食品食用的安全性。PCR技术自1971年的Kleppe 等人提出,至今已经存在47年,随着时间的推移发站,PCR技术不断地随着发展、完善,并且对于食品中检测微生物的准确度随着不断的完善,检测结果也越来越精准,使得PCR技术在食品微生物检测中占据的位置越来越重要。
2.PCR技术检测原理。对于食品微生物的进行检测的过程中,PCR技术进行检测的基本原理其实就是在一定的高温状态下,通过利用温度的高、中、低的变化对于那些2的指数的核酸分子进行不断复制、增加的循环的过程。其实简单的讲,就是在利用PCR技术进行检测的过程中,对于食品中的微生物在高温94℃的情况下,对于微生物的双链的DNA序列进行变形的过程,即:解链变成双链。然后再在温度55℃的情况下,将变形后的物质与单链的DNA进行组合,最后再讲二次进行结合的组织进行延伸复制,进而检测食品中微生物的DNA序列。通过以上的步骤对于微生物的DNA序列进行大量的复制增加,再利用凝胶电泳进行最后的DNA检测。
3.PCR技术检测的优点。在利用PCR技术进行食品检测的过程中,PCR技术有三项优点。首先,在传统的食品检测的过程中,操作的步骤非常的繁杂,并且传统的检测设备的自动化水平非常的低,而且传统食品检测的过程中消耗的人力、物力、财力等资源非常的多,不利于长远的发展。因此,相比较传统的检测技术,PCR技术不仅检测防范比较简单,而且检测的设备的自动化程度高,消耗的资源少,具有非常大的方便性。其次,快捷性。在传统的检测的过程中,对于食品中微生物的检测需要的时间一般都会比较长,如:腐败菌一类的微生物的检测,最少两天,最长7天。这样的检测时间太长,所以不利于食品上市的最佳时机,造成相关企业的经济损失,阻碍到企业的发展。不过在利用PCR技术之后,相关的部门的工作效率逐渐的提高,而且检测结果在一天之内就可以出来,有效的促进了相关企业的发展。第三,准确性,在传统的检测的过程中,由于食品中的微生物比较多,传统的技术难以进行全面性的检测,所以检测的结果并不是非常的准确。不过在利用PCR技术之后,这些问题都可以有效的進行避免,所以对于食品中微生物的检测的准确率越来越高,有效的提高了食品食用的安全性。
二、PCR技术在食品微生物检测中的应用
1.常规法。在对于食品中微生物检测的过程中,PCR技术还可以分进行不同的检测。一般对于一些原理简单的使用的都是常规检测。常规法,一般都是立足与DNA模板上,对于不同时期的DNA片段进行相应的循环复制的过程,不过在检测过程中,对于DNA模板以及相应的引物中加入一定量的聚合酶,这样检测出来的结果的准确性才会高。
2.多重法。在常规法之后的多重法,相比较常规法,多重法在检测过程中加入的引物比较多,而且多重法拥有常规法所有的优点,有效的减少了检测的步骤,使得检测试验更加的简单化,同时这种检测方法对于混合物中的一些互补的引物,还可以增加一定程度的DNA片段,更甚至可以直接性的检测多个基因,不过这种检测方法的检测效率相对比较低,所以对于其还需要不断的完善。
这种方法一般都应用于微生物中的肠出血性大肠杆菌以及沙门氏菌的检测。如:在进行对于肠出血性大肠杆菌进行检测的过程中,常规法难以进行全面性的检测,所以在检测的过程中利用多重法。相关的检测人员通过利用相关的免疫磁分离技术进行微生物的分离,再利用多重法进行进一步的检测,并且利用贺毒素、紧密素等基因进行辅助的分析检测,并且利用这种方法对于食品中牛肉类大肠杆菌流行因子进行检测,并且得到成效。
此外,有一些食品中的非致病菌也是利用多重法进行检测。如:乳酸菌,对于这种食品进行检测的过程中,相关的检测人员采用的是立足于rRNA ISR 与 16S rRNA 基础上,建立的多重PCR进行检测食品的腐败,并且有一些检测人员还会利用变性梯度凝胶电泳法进行二次检测,通过这样多次检测的方式,保证了食品的安全性,所以在日常的食品检测中,多重法应用的比较多。
3.逆转录聚合酶链反应法。在对于相应的食品检测的过程中,除了常规法和多重法,还有逆转录聚合酶反应法。这种方法相比较前两种方法,其是利用食品中细胞的相关的提取法,对于RNA进行提取并且建立模板获取相应的CDNA,然后再利用此过程作为基础复制增加PCR。这种方法检测的灵敏性非常的强,而且得到的检测结果数据也非常的准确,所以这种方法一般都利用在对于DNA菌体以及RNA菌体两者差别的检测中。
综上所述,随着我国社会经济的不断发展,我国的食品的安全工作越来越受到人们的重视,为了保证食品食用的安全性,相关的部门对于食品的检测工作加强管理,并且为了更好地检测食品的安全性,还采用了PCR技术进行检测。在使用PCR技术之后,不得不说,其对于食品中微生物的检测操作方法不仅很简单,而且快捷、检测准确性高,有效地帮助技术人员提高了食品的安全性管理。
参考文献:
[1]胡 博.PCR技术在食品微生物检测中的应用[J].现代食品,2017
[2]章忠辉.PCR技术在食品微生物检测中的应用[J].商品与质量,2017
[3]张 磊.PCR技术及其在食品微生物检测中的应用[J].食品安全导刊,2017
关键词:PCR技术 食品 微生物检测 应用
一、PCR技术的概述
1.PCR技术的概述。随着我国科学技术的发展,我国的食品安全检测采用了PCR技术,有效的提高了食品食用的安全性。PCR技术自1971年的Kleppe 等人提出,至今已经存在47年,随着时间的推移发站,PCR技术不断地随着发展、完善,并且对于食品中检测微生物的准确度随着不断的完善,检测结果也越来越精准,使得PCR技术在食品微生物检测中占据的位置越来越重要。
2.PCR技术检测原理。对于食品微生物的进行检测的过程中,PCR技术进行检测的基本原理其实就是在一定的高温状态下,通过利用温度的高、中、低的变化对于那些2的指数的核酸分子进行不断复制、增加的循环的过程。其实简单的讲,就是在利用PCR技术进行检测的过程中,对于食品中的微生物在高温94℃的情况下,对于微生物的双链的DNA序列进行变形的过程,即:解链变成双链。然后再在温度55℃的情况下,将变形后的物质与单链的DNA进行组合,最后再讲二次进行结合的组织进行延伸复制,进而检测食品中微生物的DNA序列。通过以上的步骤对于微生物的DNA序列进行大量的复制增加,再利用凝胶电泳进行最后的DNA检测。
3.PCR技术检测的优点。在利用PCR技术进行食品检测的过程中,PCR技术有三项优点。首先,在传统的食品检测的过程中,操作的步骤非常的繁杂,并且传统的检测设备的自动化水平非常的低,而且传统食品检测的过程中消耗的人力、物力、财力等资源非常的多,不利于长远的发展。因此,相比较传统的检测技术,PCR技术不仅检测防范比较简单,而且检测的设备的自动化程度高,消耗的资源少,具有非常大的方便性。其次,快捷性。在传统的检测的过程中,对于食品中微生物的检测需要的时间一般都会比较长,如:腐败菌一类的微生物的检测,最少两天,最长7天。这样的检测时间太长,所以不利于食品上市的最佳时机,造成相关企业的经济损失,阻碍到企业的发展。不过在利用PCR技术之后,相关的部门的工作效率逐渐的提高,而且检测结果在一天之内就可以出来,有效的促进了相关企业的发展。第三,准确性,在传统的检测的过程中,由于食品中的微生物比较多,传统的技术难以进行全面性的检测,所以检测的结果并不是非常的准确。不过在利用PCR技术之后,这些问题都可以有效的進行避免,所以对于食品中微生物的检测的准确率越来越高,有效的提高了食品食用的安全性。
二、PCR技术在食品微生物检测中的应用
1.常规法。在对于食品中微生物检测的过程中,PCR技术还可以分进行不同的检测。一般对于一些原理简单的使用的都是常规检测。常规法,一般都是立足与DNA模板上,对于不同时期的DNA片段进行相应的循环复制的过程,不过在检测过程中,对于DNA模板以及相应的引物中加入一定量的聚合酶,这样检测出来的结果的准确性才会高。
2.多重法。在常规法之后的多重法,相比较常规法,多重法在检测过程中加入的引物比较多,而且多重法拥有常规法所有的优点,有效的减少了检测的步骤,使得检测试验更加的简单化,同时这种检测方法对于混合物中的一些互补的引物,还可以增加一定程度的DNA片段,更甚至可以直接性的检测多个基因,不过这种检测方法的检测效率相对比较低,所以对于其还需要不断的完善。
这种方法一般都应用于微生物中的肠出血性大肠杆菌以及沙门氏菌的检测。如:在进行对于肠出血性大肠杆菌进行检测的过程中,常规法难以进行全面性的检测,所以在检测的过程中利用多重法。相关的检测人员通过利用相关的免疫磁分离技术进行微生物的分离,再利用多重法进行进一步的检测,并且利用贺毒素、紧密素等基因进行辅助的分析检测,并且利用这种方法对于食品中牛肉类大肠杆菌流行因子进行检测,并且得到成效。
此外,有一些食品中的非致病菌也是利用多重法进行检测。如:乳酸菌,对于这种食品进行检测的过程中,相关的检测人员采用的是立足于rRNA ISR 与 16S rRNA 基础上,建立的多重PCR进行检测食品的腐败,并且有一些检测人员还会利用变性梯度凝胶电泳法进行二次检测,通过这样多次检测的方式,保证了食品的安全性,所以在日常的食品检测中,多重法应用的比较多。
3.逆转录聚合酶链反应法。在对于相应的食品检测的过程中,除了常规法和多重法,还有逆转录聚合酶反应法。这种方法相比较前两种方法,其是利用食品中细胞的相关的提取法,对于RNA进行提取并且建立模板获取相应的CDNA,然后再利用此过程作为基础复制增加PCR。这种方法检测的灵敏性非常的强,而且得到的检测结果数据也非常的准确,所以这种方法一般都利用在对于DNA菌体以及RNA菌体两者差别的检测中。
综上所述,随着我国社会经济的不断发展,我国的食品的安全工作越来越受到人们的重视,为了保证食品食用的安全性,相关的部门对于食品的检测工作加强管理,并且为了更好地检测食品的安全性,还采用了PCR技术进行检测。在使用PCR技术之后,不得不说,其对于食品中微生物的检测操作方法不仅很简单,而且快捷、检测准确性高,有效地帮助技术人员提高了食品的安全性管理。
参考文献:
[1]胡 博.PCR技术在食品微生物检测中的应用[J].现代食品,2017
[2]章忠辉.PCR技术在食品微生物检测中的应用[J].商品与质量,2017
[3]张 磊.PCR技术及其在食品微生物检测中的应用[J].食品安全导刊,2017