【摘 要】
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为探究糖基化修饰对布鲁氏菌P39蛋白免疫原性的影响,本试验对布鲁氏菌P39蛋白进行了表达和纯化,并对表达的蛋白进行了甘露六糖修饰。参照GenBank公布的布鲁氏菌P 39基因序列
【基金项目】
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国家自然科学基金“寡糖修饰对布鲁氏菌抗原蛋白rRS-α免疫原性影响的研究”(31302062);吉林省科技支撑项目“生物反应器与药物开发创新团队专利示范培育”(20160312008ZG);吉林省自然基金“糖基化修饰对布鲁氏菌重要抗原免疫原性影响的研究”(20180101260JC);吉林农业大学博士启动基金“虫草素代谢途径分析及相关基因的克隆表达”(2015016)
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为探究糖基化修饰对布鲁氏菌P39蛋白免疫原性的影响,本试验对布鲁氏菌P39蛋白进行了表达和纯化,并对表达的蛋白进行了甘露六糖修饰。参照GenBank公布的布鲁氏菌P 39基因序列设计引物,从布鲁氏菌16M基因组中克隆P 39基因片段并连接至pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取阳性菌株质粒进行酶切等鉴定,鉴定正确后构建重组质粒pGEX-6P-1-P39,对重组蛋白进行诱异表达与条件优化。利用SDS-PAGE和Western blotting对诱导表达的目的蛋白进行分析,将鉴定正确的蛋白经
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