【摘 要】
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目的 探讨小剂量衣霉素在诱导骨髓瘤细胞分化中的分子机制.方法 采用小剂量衣霉素处理骨髓瘤细胞U266和RPMI8226,细胞形态学观察和流式细胞术分析细胞表面CD49e的表达率,ELIS
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目的 探讨小剂量衣霉素在诱导骨髓瘤细胞分化中的分子机制.方法 采用小剂量衣霉素处理骨髓瘤细胞U266和RPMI8226,细胞形态学观察和流式细胞术分析细胞表面CD49e的表达率,ELISA法检测培养上清液中免疫球蛋白轻链的变化,实时定量PCR检测未折叠蛋白反应相关基因GRP78、GRP94的表达情况,实时定量PCR和Western blot法检测基因XBP-1u/s mRNA和蛋白表达水平.分别采用RNA干扰沉默基因XBP-1和质粒转染过表达基因XBP-1 u/s后,观察细胞的分化情况.结果 小剂量衣霉素可诱导骨髓瘤细胞系U266、RPMI8226细胞向成熟阶段分化.形态学观察发现细胞胞核缩小,胞质丰富,核质的比例下降,核仁减少或消失.细胞表面CD49e表达率增高,同时在细胞培养上清中分泌的免疫球蛋白轻链蛋白含量增高.未折叠蛋白反应相关的基因GRP78、GRP94表达上调,伴随着细胞分化的过程XBP-1u在转录翻译水平表达上凋,而剪切体形式XBP-1s则表达相对下调.通过RNA干扰沉默基因XBP-1的表达,则细胞分化水平发生阻断.而过表达XBP-1u则可以促进骨髓瘤细胞的分化.结论 小剂量的衣霉素以诱导骨髓瘤细胞发生分化为主,在此过程中细胞发生了未折叠蛋白反应,其中基因XBP-1u在骨髓瘤细胞分化和未折叠蛋白反应的过程中起着关键的作用.
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