背景 单纯疱疹病毒性角膜基质炎(HSK)是一种由CD4+T淋巴细胞介导的免疫病理性疾病.国外研究发现,白细胞介素-9(IL-9)在多种免疫性疾病的发病过程中发挥重要作用,但在HSK中是否起作用目前少有报道. 目的 研究小鼠HSK发生和发展过程中IL-9在角膜组织中的表达,探讨IL-9的表达与HSK进展程度之间的关系.方法 4～6周龄清洁级健康BALB/c小鼠180只分为对照组20只和实验组160只.对照组仅进行“#”字形划痕,不接种病毒；实验组小鼠角膜用注射针划痕后接种5μl含有1×106空斑单位(PFU)/ml的Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1) KOS毒株建立HSK小鼠模型.分别于病毒接种前(0 d),接种后1、3、5、7、8、10、14、21 d在裂隙灯显微镜下观察小鼠角膜的变化；于接种后14 d制备角膜组织切片,苏木精-伊红染色观察角膜的组织病理学改变；采用荧光实时定量PCR(real-time PCR)法检测IL-9 mRNA在小鼠角膜组织中的表达；采用免疫荧光组织化学方法检测IL-9蛋白在小鼠角膜组织中的表达. 结果 裂隙灯显微镜下观察结果显示,小鼠角膜接种HSV-1后第3天,实验组小鼠出现点状、树枝状、地图状角膜上皮缺损,接种后6d内上皮缺损痊愈,但于接种后第7天起出现角膜基质灰白色混浊,14d基质混浊加重并达高峰,之后逐渐减轻.Real-time PCR结果显示,未接种病毒(0 d)的正常小鼠角膜组织中仅有极微量的IL-9 mRNA表达,实验组小鼠接种病毒后1、3、5、7、8、10、14 d IL-9 mRNA在角膜组织中的相对表达量分别为6.37 ±0.45、5.66±0.53、3.93±0.35、3.62 ±0.34、3.23±0.18、2.57±0.14、2.19 ±0.20,总体表达差异有统计学意义(F=92.764,P=0.000),其中接种后各时间点IL-9 mRNA相对表达量与0d比较明显增高,差异均有统计学意义(P＜0.05),接种病毒后21 d,IL-9 mRNA相对表达量与0d比较差异无统计学意义(P=0.340).免疫荧光组织化学法检测显示,IL-9蛋白在实验组小鼠角膜的上皮层、基质层及内皮细胞层呈强阳性表达,而对照组小鼠角膜组织中未见IL-9蛋白的表达.结论 采用角膜划痕和HSV-1 KOS毒株接种法可成功建立BALB/c小鼠HSK模型,IL-9参与了HSK的免疫炎症反应。