H5N1亚型AIVNS1基因在大肠杆菌中的表达

来源 :畜牧与饲料科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gift19852003
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根据巳测得的H5N1亚型禽流感病毒的NS基因序列,设计并合成一对特异性引物NS1U/NS1L,利用RT—PCR方法扩增出该毒株的NS1基因。将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-32a(书)上,通过酶切分析及序列测定,鉴定出了NS1,基因片段的阶浊重组子。转化BL21大肠杆菌感受态细胞后。经IPTG诱导和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。成功表达出大小约45.0kD的NS1融合蛋白,表达产物主要存在于包涵体中。用Weslern-Blotting证实重组融合蛋白可以特异性地被标准阳性血清所识别。
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