【摘 要】
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目的建立快速检测H5亚型禽流感病毒HA基因的实时荧光定量RT-PCR方法,为禽流感病毒的监测和感染的预防控制提供科学的技术手段。方法针对H5亚型禽流感病毒血凝素（HA）基因保守区
【基金项目】
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江苏省科技支撑计划(社会发展)项目(No.BE2012609);国家重大传染病专项课题(No.2008ZX10004-008);国家“十一五”科技重大项目(No.2009ZX10004-315);南京军区重点课题(No.10Z038);南京军区重点课题(No.11C040)
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目的建立快速检测H5亚型禽流感病毒HA基因的实时荧光定量RT-PCR方法,为禽流感病毒的监测和感染的预防控制提供科学的技术手段。方法针对H5亚型禽流感病毒血凝素（HA）基因保守区域设计特异性引物与荧光探针;通过体外克隆技术获得阳性定量标准品;优化探针、引物浓度、反应体系与反应条件,提高检测方法的特异性、敏感性与重复性,并进行定量分析。结果反应体系具有良好的扩增效率,80 min内可完成扩增检测工作;检测灵敏度为100拷贝/反应,通过外标准品建立的标准曲线在一条直线上;3个外标准品的变异系数（CV）分别为2
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