建立同时检测人血浆百草枯和敌草快浓度的高效液相色谱方法。
方法采用35%高氯酸和微孔滤膜对所有血浆样品进行预处理，应用Waters 2695高效液相色谱仪检测百草枯和敌草快的色谱峰，流动相为乙腈∶缓冲液(6∶ 94)，缓冲液含反相离子对1-庚烷磺酸钠(20 mmol/L)和磷酸(1.5%)，用三乙胺调节pH至2.0；柱温40 ℃，流速0.8 ml/min；百草枯检测波长为254 nm，敌草快检测波长为309 nm，将百草枯和敌草快色谱峰峰面积带入当日标准曲线计算其浓度。
结果采用反相离子对高效液相色谱法检测到的百草枯和敌草快色谱峰峰形良好，百草枯保留时间为4.652 min，敌草快保留时间为5.066 min，两峰分离良好，不受杂质峰干扰。百草枯在0.097 7～50.000 0 μg/ml浓度范围内色谱峰面积与浓度间线性良好，最低检测浓度为0.090 0 μg/ml；敌草快在0.097 7～50.000 0 μg/ml浓度范围内色谱峰面积与浓度间线性良好，最低检测浓度为0.070 0 μg/ml。高、中、低浓度百草枯血浆标准品溶液的绝对回收率和相对回收率分别为98.75%～103.86%和102.29%～107.26%，敌草快分别为99.67%～111.55%和100.85%～101.94%，其相对标准偏差(RSD)均<3%。百草枯日内精密度高、中、低浓度均值为51.030 0、6.429 6、0.767 0 μg/ml，敌草快日内精密度高、中、低浓度均值为50.178 6、6.509 1、0.829 4 μg/ml，百草枯和敌草快日内精密度的RSD为0.40%～3.22%。百草枯日间精密度高、中、低浓度均值分别为52.707 5、6.442 5、0.767 5 μg/ml，敌草快日间精密度高、中、低浓度均值分别为51.650 1、6.519 2、0.829 3 μg/ml，百草枯和敌草快日间精密度的RSD为0.20%～2.49%。高、中、低浓度百草枯和敌草快血浆标准品溶液经－70 ℃冻融不同次数(1、2次)、－20 ℃保存不同时间(3、7 d)、预处理后室温放置不同时间(8、24 h)，4 ℃放置不同时间(1、2 d)与未经上述处理的血浆标准品溶液检测结果显示，RSD均<10%。
结论本研究建立了可同时测定百草枯和敌草快血浆浓度的反相离子对高效液相色谱方法，该法具有快速、准确的特点。