【摘 要】
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以对虾白斑病毒DNA为模板扩增出Vp28基因，经限制性内切酶（SmaI，Not I）酶切后按正确的读码框顺序插入到pGEX-4T-2表达载体上，重组质粒转化大肠杆菌，经菌落PCR和质粒双酶切鉴定、序列
【机 构】
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福建农林大学食品科学学院,泉州师范学院化学与生命科学学院
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以对虾白斑病毒DNA为模板扩增出Vp28基因，经限制性内切酶（SmaI，Not I）酶切后按正确的读码框顺序插入到pGEX-4T-2表达载体上，重组质粒转化大肠杆菌，经菌落PCR和质粒双酶切鉴定、序列测定确认，证实成功地构建了Vp28基因原核表达载体．转化菌经IPTG诱导表达，SDS-PAGE显示有与预期大小约52kD相吻合的融合蛋白带，18℃诱导24h后获得了可溶性表达的目的蛋白，采用Glutathione Sepharose 4B亲和层析对重组蛋白进行纯化，获得了纯度很高的目的蛋白．
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