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摘要
[目的]探讨叶菌唑含量的气相色谱分析方法，为叶菌唑分析方法的建立提供参考。[方法]以邻苯二甲酸正辛酯为内标，采用气相色谱仪测定叶菌唑含量。[结果]叶菌唑含量与峰面积成良好的线性关系，R2等于0.993 2；方法的平均回收率为98.59%，相对标准偏差为0.50%，符合农药分析要求。[结论]该方法可简明地分析出结果并且过程易操作，具有良好的灵敏度、回收率和重复性，可用于叶菌唑定量分析。
关键词 叶菌唑；内标法；气相色谱分析法
中图分类号 S482.2 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2015）15-139-02
Determination of Metconazole Content by Gas Chromatography （GC）
CHEN Zhiyuan1， DAI Yulin2，LIU Zhiyong3， SUN Yaquan2， 4*
（1. Nanjing University of Technology， Nanjing， Jiangsu 210000； 2. Yancheng Teachers University， Yancheng， Jiangsu 224051； 3.Sword Agrochemicals Company， Yancheng， Jiangsu 224799； 4.Marine Organisms Pharmaceutical Technology Limited Company， Dafeng Yancheng Teachers College， Dafeng， Jiangsu 224100）
Abstract [Objective] GC analysis method for metconazole content was explored to provide reference for establishment of metconazole analysis method. [Method] The content of metconazole was determined by GC with noctyl phthalate as internal standard. [Result] The linear relationship between metconazole content and peak area was good， and R2 was equal to 0.993 2. Average recovery of the method was 98.59%， and RSD was 0.5%， which met with the requirement of pesticides analysis. [Conclusion] This method had good sensitivity and recovery， so it can be used for quantitative analysis of metconazole.
Key words Metconazole； Internal standard； Gas chromatography （GC）
早在20世紀60年代末西德拜耳公司和比利时詹森公司第1次发表了关于1取代唑类衍生物的杀菌活性的报道，而唑类化合物引起人们高度重视在20世纪70年代初[1-3]，其高效杀菌型被国际农药界广泛关注，而后三氮唑类农用化学品得到了迅速的开发和应用，它是一类内吸性杀菌剂，目前市场上有几十种产品[4]。 1990年三唑类杀菌剂数量占杀菌剂总量的10%，三唑类杀菌剂具有内吸功能和保护、治疗作用，被广泛用于由子囊菌、担子菌等真菌引起的多种病害的防治[5-6]。因此，研究叶菌唑（图1）的作用机理及建立其测定方法具有重要意义。为此，笔者以邻苯二甲酸正辛酯为内标，建立了叶菌唑含量的气相色谱分析方法，旨在为叶菌唑测定方法的建立提供理论依据。
图1 叶菌唑的结构式
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1
仪器。GC2008B型气相色谱仪由辽宁沈阳光正分析仪器有限公司提供。
1.1.2
试剂。丙酮；4号样品的叶菌唑；内标邻苯二甲酸正辛酯。
1.2 色谱条件
1.3.1
线性关系考察。标样为叶菌唑，内标为邻苯二甲酸正辛酯，溶剂为丙酮，以标样和内标不同的比值来检测内标物的可靠性，以峰面积为纵坐标，以标样/内标比值为横坐标作图考察线性关系，要求线性相关系数不小于0.990。对同一样品进行测定，标样/内标比值分别为0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4。
1.3.2
精密度考察。对同一样品进行6次平行测定，计算标准偏差和变异系数，要求变异系数（RSD）不大于2.0%。使用外标法定量计算。
1.3.3
准确度考察。在已知含量的试样中添加不同量的标准溶液，测定回收率，要求回收率在95%～105%范围内。现已知试样含量为 92.34%，添加不同量的标样（94.60%），配成溶液，测定回收率。
2 结果与分析
2.1 分析条件的确定
2.1.1
内标物的选择。
分别以邻苯二甲酸异辛酯、邻苯甲酸丙酯、邻苯二甲酸二甲脂等作为内标物，气相检测发现以邻苯二甲酸正辛酯做内标最合适（图2、3）。
2.1.2
峰定位。
分别对不加内标和添加内标的样品进行检测，根据图4和图5推测6.5 min左右是样品的峰。 图3 未加内标样品气相色谱
图4 加内标样品气相色谱
2.1.3
柱温的选择。在不同的柱温条件下检测样品的出峰情况，确定最佳柱温条件为240 ℃（图5）。
图5 240 ℃柱温条件下气相色谱
2.1.4
最佳流速的确定。
设定以下3种不同的柱流量和总流量：柱流量为20 ml/min，总流量为63 ml/min，分流比为2.0；柱流量15 ml/min，总流量48 ml/min，分流比为2.0；柱流量为10 ml/min，总流量为33 ml/min，分流比为2.0。根据出峰情况确定最佳的柱流速如下：柱流量為15 ml/min，总流量为48 ml/min，分流比为2.0（图6）。
图6 在柱流量为15.00 ml/min、总流量48.0 ml/min、分流比2.0条件下气相色谱
2.2 叶菌唑线性关系
由图7可知，以峰面积为纵坐标，以标样/内标比值为横坐标得到的叶菌唑线性关系方程为：y=0.178 3x+0.251 9，R2=0.993 2，则R=0.996 5>0.990符合分析条件。
2.3 方法的精密度
由表1可知，方法的变异系数（RSD）等于0.50%<2.0%，符合农药残留分析要求。
2.4 方法的准确度
由表2可知，方法的平均回收率为98.59%，在95%～105%范围内，符合分析要求。
3 结论
试验建立了气相色谱测定叶菌唑含量体系。采用该方法可简明地分析出结果而且过程易操作，具有良好的灵敏度、回收率和重复性，可用于叶菌唑的定量分析。
参考文献
[1]
蔡志华，郭正元.三唑类杀菌剂的研究进展[J].新农药，2005， 44（6）：23-25.
[2] 杨杨，吕文硕.生物活性的N取代1，2，4三唑类化合物的研究发展[J].化学通报，1996，25 （10）：6-13.
[3] 王进贤，译.三唑类化合物的杀菌和植物生长调节作用[J].农药，1988，27（5）：50-55.
[4] 刘传德，王培嵩，王继秋，等.三唑类杀菌剂及其在小麦病害防治中的应用研究进展[J].山东农业大学学报：自然科学版，2005，36（1）：157-162.
[5] 周子燕，李昌春，高同春，等.三唑类杀菌剂的研究进展[J].安徽农业科学，2008（27）：11842-11844.
[6] SPOLTI P，DE JORGE B C，DEL PONTE E M.Sensitivity of Fusarium graminearum causing head blight of wheat in Brazil to tebuconazole and metconazole fungicides[J].Tropical Plant Pathology， 2012， 37（6）：419-423.
[目的]探讨叶菌唑含量的气相色谱分析方法，为叶菌唑分析方法的建立提供参考。[方法]以邻苯二甲酸正辛酯为内标，采用气相色谱仪测定叶菌唑含量。[结果]叶菌唑含量与峰面积成良好的线性关系，R2等于0.993 2；方法的平均回收率为98.59%，相对标准偏差为0.50%，符合农药分析要求。[结论]该方法可简明地分析出结果并且过程易操作，具有良好的灵敏度、回收率和重复性，可用于叶菌唑定量分析。
关键词 叶菌唑；内标法；气相色谱分析法
中图分类号 S482.2 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2015）15-139-02
Determination of Metconazole Content by Gas Chromatography （GC）
CHEN Zhiyuan1， DAI Yulin2，LIU Zhiyong3， SUN Yaquan2， 4*
（1. Nanjing University of Technology， Nanjing， Jiangsu 210000； 2. Yancheng Teachers University， Yancheng， Jiangsu 224051； 3.Sword Agrochemicals Company， Yancheng， Jiangsu 224799； 4.Marine Organisms Pharmaceutical Technology Limited Company， Dafeng Yancheng Teachers College， Dafeng， Jiangsu 224100）
Abstract [Objective] GC analysis method for metconazole content was explored to provide reference for establishment of metconazole analysis method. [Method] The content of metconazole was determined by GC with noctyl phthalate as internal standard. [Result] The linear relationship between metconazole content and peak area was good， and R2 was equal to 0.993 2. Average recovery of the method was 98.59%， and RSD was 0.5%， which met with the requirement of pesticides analysis. [Conclusion] This method had good sensitivity and recovery， so it can be used for quantitative analysis of metconazole.
Key words Metconazole； Internal standard； Gas chromatography （GC）
早在20世紀60年代末西德拜耳公司和比利时詹森公司第1次发表了关于1取代唑类衍生物的杀菌活性的报道，而唑类化合物引起人们高度重视在20世纪70年代初[1-3]，其高效杀菌型被国际农药界广泛关注，而后三氮唑类农用化学品得到了迅速的开发和应用，它是一类内吸性杀菌剂，目前市场上有几十种产品[4]。 1990年三唑类杀菌剂数量占杀菌剂总量的10%，三唑类杀菌剂具有内吸功能和保护、治疗作用，被广泛用于由子囊菌、担子菌等真菌引起的多种病害的防治[5-6]。因此，研究叶菌唑（图1）的作用机理及建立其测定方法具有重要意义。为此，笔者以邻苯二甲酸正辛酯为内标，建立了叶菌唑含量的气相色谱分析方法，旨在为叶菌唑测定方法的建立提供理论依据。
图1 叶菌唑的结构式
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1
仪器。GC2008B型气相色谱仪由辽宁沈阳光正分析仪器有限公司提供。
1.1.2
试剂。丙酮；4号样品的叶菌唑；内标邻苯二甲酸正辛酯。
1.2 色谱条件
1.3.1
线性关系考察。标样为叶菌唑，内标为邻苯二甲酸正辛酯，溶剂为丙酮，以标样和内标不同的比值来检测内标物的可靠性，以峰面积为纵坐标，以标样/内标比值为横坐标作图考察线性关系，要求线性相关系数不小于0.990。对同一样品进行测定，标样/内标比值分别为0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4。
1.3.2
精密度考察。对同一样品进行6次平行测定，计算标准偏差和变异系数，要求变异系数（RSD）不大于2.0%。使用外标法定量计算。
1.3.3
准确度考察。在已知含量的试样中添加不同量的标准溶液，测定回收率，要求回收率在95%～105%范围内。现已知试样含量为 92.34%，添加不同量的标样（94.60%），配成溶液，测定回收率。
2 结果与分析
2.1 分析条件的确定
2.1.1
内标物的选择。
分别以邻苯二甲酸异辛酯、邻苯甲酸丙酯、邻苯二甲酸二甲脂等作为内标物，气相检测发现以邻苯二甲酸正辛酯做内标最合适（图2、3）。
2.1.2
峰定位。
分别对不加内标和添加内标的样品进行检测，根据图4和图5推测6.5 min左右是样品的峰。 图3 未加内标样品气相色谱
图4 加内标样品气相色谱
2.1.3
柱温的选择。在不同的柱温条件下检测样品的出峰情况，确定最佳柱温条件为240 ℃（图5）。
图5 240 ℃柱温条件下气相色谱
2.1.4
最佳流速的确定。
设定以下3种不同的柱流量和总流量：柱流量为20 ml/min，总流量为63 ml/min，分流比为2.0；柱流量15 ml/min，总流量48 ml/min，分流比为2.0；柱流量为10 ml/min，总流量为33 ml/min，分流比为2.0。根据出峰情况确定最佳的柱流速如下：柱流量為15 ml/min，总流量为48 ml/min，分流比为2.0（图6）。
图6 在柱流量为15.00 ml/min、总流量48.0 ml/min、分流比2.0条件下气相色谱
2.2 叶菌唑线性关系
由图7可知，以峰面积为纵坐标，以标样/内标比值为横坐标得到的叶菌唑线性关系方程为：y=0.178 3x+0.251 9，R2=0.993 2，则R=0.996 5>0.990符合分析条件。
2.3 方法的精密度
由表1可知，方法的变异系数（RSD）等于0.50%<2.0%，符合农药残留分析要求。
2.4 方法的准确度
由表2可知，方法的平均回收率为98.59%，在95%～105%范围内，符合分析要求。
3 结论
试验建立了气相色谱测定叶菌唑含量体系。采用该方法可简明地分析出结果而且过程易操作，具有良好的灵敏度、回收率和重复性，可用于叶菌唑的定量分析。
参考文献
[1]
蔡志华，郭正元.三唑类杀菌剂的研究进展[J].新农药，2005， 44（6）：23-25.
[2] 杨杨，吕文硕.生物活性的N取代1，2，4三唑类化合物的研究发展[J].化学通报，1996，25 （10）：6-13.
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[5] 周子燕，李昌春，高同春，等.三唑类杀菌剂的研究进展[J].安徽农业科学，2008（27）：11842-11844.
[6] SPOLTI P，DE JORGE B C，DEL PONTE E M.Sensitivity of Fusarium graminearum causing head blight of wheat in Brazil to tebuconazole and metconazole fungicides[J].Tropical Plant Pathology， 2012， 37（6）：419-423.