小鼠BRI3基因的克隆及其诱导细胞死亡的作用

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为了阐明TNFa 作用的分子机制, 用抑制消减杂交(SSH)技术和反转录PCR(RT-PCR)方法, 从hTNFa 处理过的小鼠脑血管内皮细胞(bEnd.3)总RNA中扩增并克隆BRI3的cDNA, 构建了BRI3基因与绿色荧光蛋白(EGFP)基因融合的表达载体pEGFP/I3. 转染L929细胞后, 发现EGFP/I3融合蛋白位于细胞质里. 通过TUNEL法检测和流式细胞仪分析初步表明, 该融合蛋白在L929细胞中的表达能够导致细胞死亡, 而且这种细胞死亡能被L929细胞中表达的Bcl-2蛋白所抑制. 提示BRI3基因的功能可能与TNFa的细胞毒作用有一定的相关性.
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