【摘 要】
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目的建立一种非同位素5α-还原酶抑制剂体外筛选模型。方法从大鼠前列腺组织中提取物5α-还原酶,与底物睾酮(T)以及供氢体NADPH共同组成了一种微量反应体系。反应产物二氢睾
【机 构】
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成都中医药大学,成都地奥制药集团药物研究所
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目的建立一种非同位素5α-还原酶抑制剂体外筛选模型。方法从大鼠前列腺组织中提取物5α-还原酶,与底物睾酮(T)以及供氢体NADPH共同组成了一种微量反应体系。反应产物二氢睾酮(DHT)用酶免技术(EIA)测定,以产物生成量确定酶活性;对反应底物、NADPH、酶浓度以及反应最佳温度和时间进行了优化。结果当底物、NADPH、酶提取物浓度分别为0.25μM、1mM和0.3mg,37℃反应60分钟可获最大酶活性。特异性5α-还原酶抑制剂非那雄胺显著降低5α-还原酶催化产物DHT的生成。进一步对24种中药进行筛选,姜黄、夏枯草等中药提取物具有5α-还原酶抑制剂作用。结论本文建立的非同位素方法有效、可行,可作为一种体外模型筛选和研究5α-还原酶抑制剂。
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