【摘 要】
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目的观察c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号传导通路特异阻断剂SP600125对脑死亡状态下大鼠心肌细胞凋亡的保护作用。方法将20只健康雄性大鼠随机分为4组,每组5只。空白对照(Sham)组:仅给予颅内置管,不加压诱导脑死亡;脑死亡(BD)组:仅诱导大鼠脑死亡并维持脑死亡6 h;SP600125组:在诱导脑死亡前1 h腹腔注射SP600125(10 mg/kg),并维持脑死亡6 h;二甲基亚砜(D
【机 构】
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目的观察c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号传导通路特异阻断剂SP600125对脑死亡状态下大鼠心肌细胞凋亡的保护作用。
方法将20只健康雄性大鼠随机分为4组,每组5只。空白对照(Sham)组:仅给予颅内置管,不加压诱导脑死亡;脑死亡(BD)组:仅诱导大鼠脑死亡并维持脑死亡6 h;SP600125组:在诱导脑死亡前1 h腹腔注射SP600125(10 mg/kg),并维持脑死亡6 h;二甲基亚砜(DMSO)组:在诱导脑死亡前1 h腹腔注射DMSO(10 mg/kg),并维持脑死亡6 h。应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测各组心肌细胞中半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)与细胞色素C(Cyt-C)mRNA和蛋白的表达,并用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色比较各组心肌细胞凋亡。
结果(1)Real-time PCR结果显示BD组Caspase-3 mRNA和Cyt-C mRNA表达(2.37±0.12、2.03±0.08)显著高于Sham组(P<0.05);BD组Caspase-3 mRNA和Cyt-C mRNA表达与DMSO组(2.38±0.11、2.06±0.09)接近(P> 0.05);SP600125 组Caspase-3 mRNA和Cyt-C mRNA表达(1.21±0.05、1.23±0.24)显著低于BD组(P< 0.05)。(2)Western blot结果显示,BD组Caspase-3和Cyt-C表达(145.63±7.21、73.67±7.35)比Sham组(38.86±8.95、18.74±8.77)显著增多(P<0.05);BD组Caspase-3和Cyt-C表达与DMSO组(146.56 ±6.87、72.45±6.84)接近(P> 0.05);SP600125组Caspase-3和Cyt-C表达(39.45±5.73、20.34± 5.69)显著低于BD组(P< 0.05)。(3)TUNEL法结果显示,BD组心肌细胞凋亡率[(26.39± 4.99)%]比Sham组[(1.41±0.35)%]显著增加(P< 0.05),DMSO组[(26.28±4.92)%]与Sham组凋亡率接近(P> 0.05),SP600125组[(7.63±3.09)%]比BD组显著降低(P< 0.05)。
结论SP600125通过特异性地抑制JNK活性显著地减轻脑死亡状态下大鼠心肌细胞凋亡。
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