目的建立测定来自传统中药九里香中的九里香酮的UPLC-MS-MS的方法,并用于测定其在SD大鼠中的血药浓度。方法 SD大鼠分成4组,每组6只,雌雄各半,分别灌胃给药九里香酮(20,50和125 mg·kg^-1)和尾静脉注射给药(20 mg·kg^-1),于不同时间点取血进行血药浓度测定。九里香酮在35℃下用C18柱进行分离,流动相为水和乙腈梯度洗脱,流速为0.3 m L·min^-1。质谱在电喷雾正离子模式下,采用三重四级杆质量分析器进行多重反应监测（MRM）:九里香酮为m/z 259.10→131.00,内标（香豆素）为m/z146.93→90.94。结果九里香酮在4.0～1600 ng·m L^-1范围内线性良好（r²>0.998）,提取回收率大于90%,日内精密度小于9.8%,日间精密度小于12.3%,室温放置4 h稳定性相对偏差（RE%）为7%,-20℃环境冻融稳定性RE%为14.8%。经过非房式模型估算药代动力参数,九里香酮的末端消除半衰期(t_1/2)分别为（2.69±1.28）h,（2.18±0.80）h,（2.51±0.70）h和（2.80±1.96）h;峰浓度(C_max)分别为（0.32±0.10）mg·L^-1,（0.51±0.14）mg·L^-1,（0.98±0.17）mg·L^-1和（0.95±0.19）mg·L^-1;AUC（0-∞）分别为（1.46±0.49）h·mg·L^-1,（2.23±0.47）h·mg·L^-1,（5.93±1.41）h·mg·L^-1和（3.76±0.70）h·mg·L^-1。结论成功建立了测定九里香酮浓度的UPLC-MS-MS的方法,并成功用于测定SD大鼠中的九里香酮的血药浓度。