【摘 要】
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目的:制备有活性的人源性抗HBsAg单链抗体.方法:应用噬菌体表面呈现技术获得人抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抗体的Fab片段,并将VH和VL基因以(Gly4Ser)3linker连接成单链,插入表
【机 构】
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解放军第458医院全军传染病中心,华南理工大学生物工程系
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目的:制备有活性的人源性抗HBsAg单链抗体.方法:应用噬菌体表面呈现技术获得人抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抗体的Fab片段,并将VH和VL基因以(Gly4Ser)3linker连接成单链,插入表达载体pQE40,筛选大肠杆菌高表达菌株.结果:工程菌表达优化试验表明,在OD600为0.6时开始诱导,持续6 h,目的蛋白表达量最高可达菌体总蛋白的31%.包涵体变性后上样镍离子螯合层析柱一步纯化,收集目的峰,透析复性,得纯度为97%的重组单链抗体,其亲和常数为0.23×108mol/L.结论:抗
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