大鼠内皮抑素在大肠杆菌中的融合表达及活性鉴定

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目的 获得有活性的内皮抑素融合蛋白.方法 利用已成功转化的pthiohis-Endo融合表达重组子的大肠杆菌TOPIO,在IPTG诱导下表达融合蛋白,亲和层析方法纯化,纯化产物经EK酶酶切后行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Westem-blot鉴定;MTT法鉴定其对人脐静脉内皮细胞增殖的影响.结果 纯化后的内皮抑素的融合蛋白经EK酶酶切行聚丙烯酰胺电泳和Western-blot鉴定与预期相符,并能抑制人脐静脉内皮细胞增殖.结论 大鼠内皮抑素基因在大肠杆菌中获得成功表达,表达的融合蛋白能够抑制人脐静脉血管内皮细胞的增殖.
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