兔抗胃癌相关蛋白GCRG213抗体的制备及鉴定

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:stoudemire21
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目的 :制备胃癌相关蛋白GCRG2 13的多克隆抗体。方法 :在大肠杆菌中表达Thioredoxin/GCRG2 13融合蛋白 ,并以所获蛋白免疫新西兰白兔 ,制备兔抗GCRG2 13的抗体。抗体的效价及特异性 ,分别用ELISA、Westernblot法鉴定。结果 :在大肠杆菌中高效表达出相对分子质量 (Mr)约为 2 940 0的Thiore doxin/GCRG2 13融合蛋白 ,经凝胶回收法得到纯度近 10 0 %的蛋白产品。制备了兔抗GCRG2 13的抗体。ELISA法检测抗体的效价达到 1∶2 560 0 0 ,Westernblot证实该抗体可与原核表达的GCRG2 13蛋白特异性结合。结论 :兔抗GCRG2 13抗体的成功制备 ,为进一步深入研究GCRG2 13的生物学功能及其在胃癌发生发展中的作用奠定了基础 Objective: To prepare a polyclonal antibody against gastric cancer associated protein GCRG213. Methods: Thioredoxin / GCRG2 13 fusion protein was expressed in E. coli and immunized New Zealand white rabbits with the obtained protein to prepare rabbit anti - GCRG2 13 antibody. The titer and specificity of the antibody were identified by ELISA and Western blot respectively. Results: Thiore doxin / GCRG2 13 fusion protein with a relative molecular mass (Mr) of about 2940 was highly expressed in E. coli and the protein product with a purity of nearly 100% was obtained by gel recovery. Antibodies to rabbit anti-GCRG2 13 were prepared. The titer of antibody detected by ELISA reached 1:2 560 0 0 and Western blot confirmed that the antibody could specifically bind to prokaryotic GCRG2 13 protein. CONCLUSION: The successful preparation of rabbit anti-GCRG2 13 antibody lays the foundation for further study on the biological function of GCRG2 13 and its role in the development of gastric cancer
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