【摘 要】
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目的探讨胰高血糖素样肽2(GLP-2)对吉西他滨(GEM)诱导的肠上皮细胞凋亡、周期及Ras-Raf-MEKERK通路的影响。方法培养人肠上皮模型细胞Caco2,根据损伤与保护措施分为溶剂对照
【基金项目】
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温州市科技计划项目(Y20130172)
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目的探讨胰高血糖素样肽2(GLP-2)对吉西他滨(GEM)诱导的肠上皮细胞凋亡、周期及Ras-Raf-MEKERK通路的影响。方法培养人肠上皮模型细胞Caco2,根据损伤与保护措施分为溶剂对照组、10 mg/L GEM损伤组和10 mg/L GEM基础上加入1μmol/L GLP-2的保护组。细胞培养24 h后,采用流式细胞术PI单染法检测分析细胞周期;采用流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双染法检测分析细胞凋亡情况;采用real-time RT-PCR检测周期相关分子CDK4、细胞凋亡相关分子BAX和FAS、Ras-Raf-MEK-ERK通路关键分子MEK mRNA的表达。结果与对照组比较,GEM不仅明显增加细胞周期G1期比例与细胞凋亡比例(P<0.05),而且使CDK4 mRNA表达下降(t=12.15,P<0.05),BAX、FAS mRNA及MEK mRNA表达升高(t分别=-12.80、-19.30、-4.55,P均<0.05)。而GLP-2干预GEM作用后,细胞周期G1期比例与细胞凋亡比例均下调,且CDK4 mRNA表达上调,BAX mRNA、FAS mRNA及MEK mRNA表达明显下调(t分别=-25.23、5.16、15.51、4.78,P均<0.05)。结论 GLP-2可抑制甚至逆转GEM所致的肠上皮细胞周期阻滞、细胞凋亡及Ras-Raf-MEK-ERK信号通路的异常活化。
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