目的 利用海藻酸纳-成年软骨细胞复合构建工程化软骨,并观察应用该工程软骨移植修复成年兔关节软骨缺损的长期效果。方法 取34周龄成年新西兰兔双膝关节软骨,分离软骨细胞.与海藻酸钠混合,细胞密度为4×10~6/ml,通过硅胶模型制成圆形柱状海藻酸纳-软骨细胞盘(20μl/个),体外培养。分别于2、4、6、8、10周取细胞盘,行苏木素-伊红(HE)、AB-PAS染色、免疫组织化学分析。同时选用成年新西兰兔28只,两侧股骨内髁造成全层软骨缺损模型,缺损处随机植入体外培养4周的海藻酸钠一软骨细胞盘(实验组)及无细胞的海藻酸钠载体(对照组),分别于术后6、12、24、48周取材,观察软骨缺损修复情况。结果 成年软骨细胞在海藻酸钠中呈丛状或球状增殖,4周时达增殖高峰,培养期内软骨细胞始终呈圆形或椭圆形,免疫组织化学显示盘中Ⅱ型胶原含量丰富,无Ⅰ型胶原产生。动物实验实验组软骨缺损以透明样软骨修复为主,对照组则以纤维组织填充为主,48周时两组修复组织均有一定程度退变。结论 成年软骨细胞在海藻酸钠中体外培养可维持良好的细胞表型,并形成工程化软骨。用此工程化软骨修复关节软骨损伤经48周观察有透明样软骨修复。