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【摘要】 目的：建立反相高效液相色谱法测定通窍鼻炎片中欧前胡素的含量测定。方法：采用超声提取方法制备供试品溶液，以C18柱作为色谱柱，甲醇-0.3％磷酸溶液（65：35）为流动相；检测波长：248nm。样品平均加样回收率为99.4%（n=6）,RSD值为0.86%,重复性试验RSD值为1.02%(n=6)。结论：方法简便，准确，重复性好，可作排毒清脂片的含量测定方法。
【关键词】 通窍鼻炎片；高效液相色谱法；含量测定
白芷为方中君药，处方中供含量测定用有黄芪、白芷2味药。黄芪为水提入药且只起到补气作用，而白芷是粉末入药且起主要通窍功能，所以选择白芷作为含量测定研究对象，由于白芷中含有欧前胡素，因此选择欧前胡素测量指标。通过大量试验研究，建立了HPLC法测定欧前胡素含量方法，对其方法的线性关系、精密度、稳定性、回收率及重复性等方法学考察均符合定量测定的要求，因此采用此方法，作为控制本品质量的指标。
1 仪器、试药与样品
1.1 仪器 安捷伦1200高效液相色谱仪、紫外检测器。
1.2 试药 欧前胡素对照品（批号:110826-200301）由中国药品生物制品检定所提供；甲醇（色谱纯），磷酸（分析纯），水（纯净水）。
1.3 样品 自制十批。
2 方法与结果
2.1 样品的制备 取本品10片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于4片量），置50ml量瓶中，加入甲醇45ml，超声提取1小时，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。
2.2 阴性样品溶液的制备 按质量标准处方比例同法制备不含白芷的阴性样品溶液。
2.3 对照品溶液的制备 精密吸取欧前胡素对照品适量，以甲醇配成浓度为10μg/ml的溶液，即得。
2.4 检测波长的选择 取上述对照溶液，用紫外可见分光光度计在波长190-500nm处扫描，结果，欧前胡素在248nm处有吸收峰，故检测波长为248nm。
2.5 色谱条件 色谱柱：C18柱(岛津VP-ODS C18 150×4.6mm)，流动相：甲醇-0.3％磷酸溶液（65：35）；流速：1.0ml/min，柱温：25℃；检测波长：248nm。
2.6 线性关系考察 精密称取欧前胡素对照品0.0100g，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，制成浓度为0.1mg/ml的储备液。精密吸取欧前胡素对照品储备液1.0ml、2.0ml、2.5ml、4.0ml、8.0ml，分别置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，各精密吸取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，以浓度（C）对峰面积（A）进行回归，考察线性关系并绘制标准曲线，得回归方程：A=56860C-1667 r=0.9996。表明欧前胡素进样量在4.0-32.0g/ml范围内线性关系良好。
2.7 精密度试验 精密吸取20μl欧前胡素对照品溶液（10μg/ml），重复进样6次，记录峰面积，RSD分别为：0.30%，表明精密度较好。
2.8 重复性试验 按供试品溶液的制备方法，对同一批样品分别制备6份供试品溶液，依法测定，欧前胡素平均含量为0.058mg/片，RSD为1.5％，说明本品的重现性较好.
2.9 穩定性实验 取同一批号样品溶液，分别在放置0、2、4、6、8h后，依法操作，测定峰面积A，RSD值为1.03%，表明稳定性较好。
2.10 加样回收率实验 取本品已知样品共6份（平均片重0.2750g），每份10片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于4片量），置50ml量瓶中，分别精密加入1.0mg/ml欧前胡素对照溶液0.2ml，加甲醇45ml，超声提取1小时，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，每份样品进样两次，同时记录10.0μg/ml欧前胡素对照品的峰面积，计算样品中欧前胡素的含量，6次平均回收率为99.4%，RSD为0.86%，表明方法回收率较好。
2.11样品测定 按正文含量测定方法依法测定本品，以峰面积按外标法计算样品中欧前胡素的含量，结果三批白芷药材欧前胡素的平均含量为0.067％，RSD为1.08%，含量较可靠稳定。
3 讨论与小结
样品欧前胡素含量测定限度的确定：根据连续十批样品测定，每片欧前胡素平均含量为0.058mg。本品处方量每片通窍鼻炎片含原药材1.1g，三批白芷药材欧前胡素含量平均值为0.067％，按欧前胡素转化率不低于50％计算，每片欧前胡素的含量应不低于0.05mg。故规定本品欧前胡素含量不低于0.05mg/片。
参考文献
［1］通窍鼻炎片 中国药典2010年版一部.573
［2］张宇宏.通窍鼻炎片质量标准研究.中国实验方剂学杂志.2002，8（6）：9-10
［3］白芷.现代实用中药质量控制技术.人民卫生出版社.348-353
【关键词】 通窍鼻炎片；高效液相色谱法；含量测定
白芷为方中君药，处方中供含量测定用有黄芪、白芷2味药。黄芪为水提入药且只起到补气作用，而白芷是粉末入药且起主要通窍功能，所以选择白芷作为含量测定研究对象，由于白芷中含有欧前胡素，因此选择欧前胡素测量指标。通过大量试验研究，建立了HPLC法测定欧前胡素含量方法，对其方法的线性关系、精密度、稳定性、回收率及重复性等方法学考察均符合定量测定的要求，因此采用此方法，作为控制本品质量的指标。
1 仪器、试药与样品
1.1 仪器 安捷伦1200高效液相色谱仪、紫外检测器。
1.2 试药 欧前胡素对照品（批号:110826-200301）由中国药品生物制品检定所提供；甲醇（色谱纯），磷酸（分析纯），水（纯净水）。
1.3 样品 自制十批。
2 方法与结果
2.1 样品的制备 取本品10片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于4片量），置50ml量瓶中，加入甲醇45ml，超声提取1小时，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。
2.2 阴性样品溶液的制备 按质量标准处方比例同法制备不含白芷的阴性样品溶液。
2.3 对照品溶液的制备 精密吸取欧前胡素对照品适量，以甲醇配成浓度为10μg/ml的溶液，即得。
2.4 检测波长的选择 取上述对照溶液，用紫外可见分光光度计在波长190-500nm处扫描，结果，欧前胡素在248nm处有吸收峰，故检测波长为248nm。
2.5 色谱条件 色谱柱：C18柱(岛津VP-ODS C18 150×4.6mm)，流动相：甲醇-0.3％磷酸溶液（65：35）；流速：1.0ml/min，柱温：25℃；检测波长：248nm。
2.6 线性关系考察 精密称取欧前胡素对照品0.0100g，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，制成浓度为0.1mg/ml的储备液。精密吸取欧前胡素对照品储备液1.0ml、2.0ml、2.5ml、4.0ml、8.0ml，分别置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，各精密吸取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，以浓度（C）对峰面积（A）进行回归，考察线性关系并绘制标准曲线，得回归方程：A=56860C-1667 r=0.9996。表明欧前胡素进样量在4.0-32.0g/ml范围内线性关系良好。
2.7 精密度试验 精密吸取20μl欧前胡素对照品溶液（10μg/ml），重复进样6次，记录峰面积，RSD分别为：0.30%，表明精密度较好。
2.8 重复性试验 按供试品溶液的制备方法，对同一批样品分别制备6份供试品溶液，依法测定，欧前胡素平均含量为0.058mg/片，RSD为1.5％，说明本品的重现性较好.
2.9 穩定性实验 取同一批号样品溶液，分别在放置0、2、4、6、8h后，依法操作，测定峰面积A，RSD值为1.03%，表明稳定性较好。
2.10 加样回收率实验 取本品已知样品共6份（平均片重0.2750g），每份10片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于4片量），置50ml量瓶中，分别精密加入1.0mg/ml欧前胡素对照溶液0.2ml，加甲醇45ml，超声提取1小时，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密吸取续滤液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，每份样品进样两次，同时记录10.0μg/ml欧前胡素对照品的峰面积，计算样品中欧前胡素的含量，6次平均回收率为99.4%，RSD为0.86%，表明方法回收率较好。
2.11样品测定 按正文含量测定方法依法测定本品，以峰面积按外标法计算样品中欧前胡素的含量，结果三批白芷药材欧前胡素的平均含量为0.067％，RSD为1.08%，含量较可靠稳定。
3 讨论与小结
样品欧前胡素含量测定限度的确定：根据连续十批样品测定，每片欧前胡素平均含量为0.058mg。本品处方量每片通窍鼻炎片含原药材1.1g，三批白芷药材欧前胡素含量平均值为0.067％，按欧前胡素转化率不低于50％计算，每片欧前胡素的含量应不低于0.05mg。故规定本品欧前胡素含量不低于0.05mg/片。
参考文献
［1］通窍鼻炎片 中国药典2010年版一部.573
［2］张宇宏.通窍鼻炎片质量标准研究.中国实验方剂学杂志.2002，8（6）：9-10
［3］白芷.现代实用中药质量控制技术.人民卫生出版社.348-353