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目的：用分子克隆技术构建肝癌组织特异性N－ras cDNA正义与反义表达载体。方法：用BamHI酶切携带目的基因的质粒pZIP-NeoSV(X)1,获得1．06kb N-ras cDNA；同时以BamHI将载体pEBAF线性化，并行去磷酸化修饰，用T4 DNA连接酶将两者连接，转化感受态细菌DH5α。先以酶切和随机引物法标记的N－ras cDNA探针进行菌落原位杂交筛选阳性重组克隆，再以PvuⅡ酶切鉴定插入方向，同时进行DNA测序和同源性分析。结果：成功构建肝癌组织特异性正义与反义表达载体pEBAF/s