碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌基因型检测和同源性分析

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目的

探讨临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌基因分型和菌株同源性。

方法

收集2011年1月至2012年6月临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌175株,采用MIC法检测菌株对药物的敏感性,纸片法表型确证试验检测超广谱β内酰胺酶(ESBL),改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,PCR、DNA测序以及BLAST比对等方法确定菌株耐药酶基因型,重复序列聚合酶链反应(REP-PCR)分析菌株同源性。

结果

175株肺炎克雷伯菌中Hodge试验阳性140株,阳性率80.0%(140/175)。102株携带blaKPC-2基因,占58.3%(102/175),6株携带blaIMP-4基因,占3.4%(6/175)。11.4%(20/175)菌株携带blaDHA-1基因。28.6%(50/175)菌株ESBL表型试验阳性。有89.1%(156/175)菌株携带blaSHV基因,63.4%(111/175)菌株携带blaTEM基因,50.3%(88/175)菌株携带blaCTX-M基因。66.9%(117/175)菌株同时具有3种以上耐药基因。REP-PCR指纹图谱扩增条带数3~8条,产物最长1600 bp,最短200 bp,分为12个谱型,其中以G型为主,有71株(40.6%),其次为F型有35株(20.0%)。

结论

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌以bla KPC-2基因型为主,其次为blaIMP-4基因型;ESBL以blaCTX-M-14基因型为主。在某些医院存在克隆株流行,北京A医院与杭州地区流行株不同,北京A医院以G型为主,杭州地区以F型为主。(中华检验医学杂志,2013,36:318-323)

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