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[摘要] 目的 探讨不明原因复发性流产临床治疗中淋巴细胞主动免疫治疗的临床价值。 方法 选取2010～2012年我院诊治的复发性流产患者50例，随机分为两组，分别行无特殊处理和淋巴细胞主动免疫治疗，同时对主动免疫治疗患者封闭抗体阴性与阳性的妊娠结局进行统计。 结果 观察组患者流产率显著低于对照组（P＜0.05）。主动免疫治疗后封闭抗体阳性患者妊娠成功率为88.5%，阴性患者妊娠成功率为57.1%,阳性组显著高于阴性组（P＜0.05）。 结论 淋巴细胞主动免疫治疗能过有效治疗复发性流产，具有良好的临床效果，而封闭抗体检测能够对妊娠结局有积极的预测作用。
[关键词] 淋巴细胞免疫疗法；复发性流产；封闭抗体；妊娠结局
[中图分类号] R714.1 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2014）08-197-03
Efficacy analysis of lymphocyte immunotherapy in treatment of recurrent miscarriage
WANG Tianhong
Department of Obstetrics and Gynecology,Third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College,Guangzhou510150,China
[Abstract] Objective To investigate the clinical value of lymphocyte active immunotherapy in the clinical treatment of unexplained recurrent miscarriage. Methods Fifty patients with recurrent abortion admitted to our hospital from 2010 to 2012 were selected, randomLy divided into two groups and received non-special treatment and lymphocyte active immunotherapy respectively.Meanwhile,the pregnancy outcomes of the patients with negative and positive blocking antibodies who received active immunotherapy were observed. Results The observation group had lower abortion rate than the control group (P＜0.05).After active immunotherapy, the successful pregnancy rate of the patients with positive blocking antibodies was 88.5% and that of those with negative blocking antibodies was 57.1%,with the positive group significantly higher than the negative group (P＜0.05). Conclusion Lymphocyte active immunotherapy can effectively treat recurrent miscarriage and shows favorable clinical effects.Blocking antibody detection is of positive predictive effect for pregnancy outcomes.
[Key words] Lymphocyte immunotherapy;Recurrent miscarriage;Blocking antibody;Pregnancy outcomes
復发性流产是持续发生两次或以上自然流产，由于病因较为复杂，可能包括解剖、遗传、感染以及内分泌等多方面的原因，而还有将近50%的患者无法明确病因[1]。这一部分无法明确原因的复发性流产成为原因不明复发性流产（unexplained recurrent spontaneous abortion，URSA）[2]。在近年来医学的发展中，生殖免疫学研究不断深入，有观点认为超过40%的不明原因复发性流产与免疫因素有关[3]。而主动免疫疗法是近年来较为常用的复发性流产治疗方案，本研究通过丈夫与男性无关第三个体的淋巴细胞行主动免疫疗法，探讨复发性流产免疫治疗的有效性。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院2010年1月～2012年12月门诊诊治的原因不明复发性流产患者50例，患者均经封闭抗体检测为阴性。患者年龄21～37岁，平均（29.8±3.2）岁；流产次数为2～4次，其中2次流产31例，3次流产12例，4次流产7例。排除生殖系统畸形、染色体异常、感染、内分泌异常、自身抗体阳性以及自身免疫性疾病的原因。所有患者均经系统化检查与病史诊断，确定入选标准为：（1）持续发生2次或2次以上自然流产，不存在死胎或死产的病史；（2）经染色体检查确定夫妇均正常，不存在家族性遗传病史，胚胎染色体的核型为正常；（3）行胰岛素、甲状腺与生殖系统内分泌检查，结果均正常，基础体温测定为双相性；（4）患者不存在生殖系统器质性病变或畸形；（5）抗核抗体、核抗原抗体、狼疮抗凝因子、抗心磷脂抗体等自身抗体检验结果均为正常；（6）行支原体、衣原体以及TORCH检查确定无生殖道感染；（7）丈夫行常规精液检查无异常，夫妇血性均不存在不合，抗体效价＞1∶128；（8）行封闭抗体或为阴性[4-6]。将患者随机分为两组，观察组患者25例行淋巴细胞主动免疫治疗，对照组25例患者未行特别处理。两组患者一般资料以统计学软件处理，各项指标差异不具有统计学意义（P＞0.05）。观察组患者均在淋巴细胞主动免疫治疗2周后再次检测封闭抗体，根据封闭抗体检测结果进行分组，治疗后转阳性的15例患者为阳性组，治疗后封闭抗体检测结果仍未阴性的35例患者为阴性组，对比两组患者的妊娠结局。
1.2 供血者筛查与封闭抗体检测
在行淋巴细胞主动免疫治疗之前，供血者均行肝肾功能、血常规、肝炎病毒检验（乙肝两对半、丙肝病毒抗体、丁肝病毒抗原与抗体、戊肝病毒抗体）、梅毒筛查以及AIDS全套病毒抗体筛查，排除通过血液传染疾病的可能性。同时与患者进行知情沟通，让患者了解免疫治疗可能存在的风险，所有患者或家属均签署知情同意书。如果配偶血源筛查不合格，则选择无关第三个体的血缘。
封闭抗体检测方法为流式细胞术，采集患者配偶外周抗凝全血100μL加入鼠抗人CD3、CD4、CD8单克隆抗体20μL，再加入患者血清或正常男性AB型血清50μL，孵育30min，加入红细胞溶解液3mL，PBS洗涤1次，以流式细胞仪客观分析。打印出加女性血清及加AB型血清的配偶T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+细胞比例，并按下列公式计算封闭效率。封闭效率=加AB型血清CD比例-加女性血清CD比例（%）。封闭抗体阳性值：正常生育者封闭效率（X-1.96s），大于此值者为封闭抗体阳性。
1.3 治疗方法
抽取患者配偶的30mL静脉血液，进行2%的肝素抗凝处理，放置在保存淋巴细胞分离液（淋巴细胞分离液的比重为1.020）的离心试管中，确保淋巴细胞分离液与抗凝处理后的血液之间界面的清晰。将试管以每分钟250转的速度离心处理25min，取出淋巴细胞层，以磷酸盐缓冲液清洗2次后，职称篱笆细胞混悬液，将细胞浓度调整为（20～40）×106/mL，以0.5～0.8mL淋巴细胞混悬液在患者两侧前臂皮下注射，注射点4～6个。每两次治疗中间间隔时间为3～4周，以3次为1个疗程。在完成1疗程的治疗后，鼓励患者在12周内受孕，在未确定妊娠之前，每隔5～6周行淋巴细胞主动免疫治疗1次。在确定患者妊娠后，每隔3周行淋巴细胞主动免疫治疗1次，持续到患者妊娠第20周。妊娠超过12周，经B型超声检查不存在异常，且无分娩活婴作为妊娠成功。
1.4 统计学方法
本组数据采用SPSS15.0软件包进行处理，计数资料比较采用x2检验，计量资料采用（）表示，组间比较进行t检验，均以P＜0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 临床疗效比较
两组患者治疗后的临床疗效比较，见表1。观察组患者流产率相比对照组明显降低（x2=9.281，P＜0.05）。
表1 两组患者治疗后的临床疗效比较[n（%）]
组别 n 分娩 流产
观察组 25 19（76.0） 6（24.0）
对照组 25 10（40.0） 15（60.0）
2.2 主动免疫疗法封闭抗体检验不同结果的妊娠结局
淋巴细胞主动免疫治疗后封闭抗体阳性与阴性的妊娠结局统计结果见表2。淋巴细胞主动免疫治疗后，封闭抗体阳性患者共18例，妊娠成功率为88.9%，封闭抗体阴性7例，妊娠成功率为57.1%。封闭抗体阳性的患者妊娠成功率显著高于阴性患者（x2=6.288，P＜0.05）。
表2 淋巴细胞主动免疫治疗后封闭抗体阳性与阴性的妊娠结局统计[n（%）]
组别 n 再次流产 妊娠成功
阳性组 18 2（32.0） 16（88.5）
阴性组 7 3（24.0） 4（57.1）
2.3 不良反应
所有患者均在主动免疫治疗后留院观察30min以上，确定不存在明显的不良反应。在治疗结束后4例患者存在局部皮肤的短期色素沉淀，无硬结存留。
3 讨论
1981年，貝尔和泰勒大胆地采用丈夫和无关第三个体的淋巴细胞进行主动免疫治疗，结果接受治疗的4名孕妇有3名妊娠成功，生下了健康的婴儿。由张世训教授领衔的山东省血液中心于1987年率先开展了这方面的临床研究。到目前为止，先后治疗210例孕妇，妊娠成功率高达87.5%。在现代免疫学的研究中，人类胚胎的形成中来自于父亲的基因抗原被视作外来侵入者，因此在母体中会产生排异反应[7]。在正常的妊娠孕妇体内，会自行产生封闭抗体，对抗自然排异性，保存胚胎的发育生长。而当母体内缺乏封闭抗体时，胚胎会受到母体自然排异的影响从而无法正常生长发育。淋巴细胞主动免疫治疗能够通过配偶的淋巴细胞移植入患者体内，刺激患者的免疫系统，从而激发患者体内封闭抗体的产生[8]。在患者再次妊娠时，已产生的封闭抗体能够通过同源抗原的识别，进行结合，确保封闭抗体效果的作用，保护胚胎的正常生长发育[9]。
本次临床研究中淋巴细胞主动免疫治疗能够有效提高妊娠成功率，从无特别处理的52%提高至84%，与相关文献报道结果一致[10-12]。同时，封闭抗体均为阴性的患者在经过主动免疫治疗后，阳性患者达到18例，而封闭抗体阳性患者的妊娠成功率相比封闭抗体阴性患者明显提高。证明通过淋巴细胞主动免疫治疗能够有效促进患者体内封闭抗体的产生，提高胚胎的成活率。而封闭抗体为阴性的患者由于体内封闭抗体未得到有效的增加，从而提高了再次流产的可能性，证明了封闭抗体对于复发性流产有明显的预测效果[13-14]。
综上所述，淋巴细胞主动免疫疗法对封闭抗体阴性的复发性流产有明显的治疗效果，能够有效促进封闭抗体的分泌，提高再次妊娠的成功率，而封闭抗体检测能够对妊娠结局预测有明显的作用。
[参考文献]
[1] 刘长明.免疫型复发性流产的发病机制与治疗[J].国际妇产科学杂志，2011，38（5）：398-401，406.
[2] 赵芳芳，蒋晓莉，郭谊，等.复发性流产与自身免疫性抗体的相关性研究[J].中国医药，2013，8（11）：1619-1620.
[3] 朱庆文，施蔚虹.复发性流产的遗传因素与同种免疫因素分析[J].中国计划生育学杂志，2013，21（3）：185-187，191.
[4] 肖青，秦爽，龚桂芳，等.淋巴细胞主动免疫治疗同种免疫型复发性流产24例临床分析[J].广州医药，2013，44（5）：42-44.
[5] 沈伶，卢焕霞，胡瑞霞，等.两种免疫治疗方法治疗封闭抗体阴性复发性流产患者的疗效观察[J].新医学，2011，42（6）：402-405.
[6] 秦卫兵，崔蓉，杨宁，等.脐血CD4+CD45+调节性T细胞体外扩增及其抑制复发性流产患者免疫细胞功能研究[J].中国免疫学杂志，2011，27（7）：625-629.
[7] 黄琳，陈建明，黄丽娟，等.复发性流产淋巴细胞免疫治疗前后再次妊娠保胎的临床观察[J].吉林医学，2012，33（5）：927-928.
[8] 田葱，李娟，攸毅，等.3种疗法用于不明原因复发性流产的临床对比研究[J].现代中西医结合杂志，2012，21（14）：1487-1489.
[9] 吴彤华，朱元昌，尹彪，等.不明原因复发性流产与HLA-DQ相关性的初步研究[J].中国免疫学杂志，2013，29（9）：955-959.
[10] 崔艳萍，钟小烨，班清媚，等.淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产的疗效研究[J].现代预防医学，2011，38（9）：1626-1627.
[11] 杨素娟，赵志明，郝桂敏，等.原因不明复发性流产患者免疫治疗前后血清中趋化因子水平变化[J].河北医科大学学报，2013，34（6）：649-652.
[12] 王海燕，吴晓云，李晓荣，等.原因不明性复发性流产淋巴细胞免疫治疗的剂量及疗效研究[J].浙江医学，2013（20）：1813-1815.
[13] 戴云先.淋巴细胞免疫治疗与复发性流产研究[J].中外医学研究，2013，11（3）：27-28.
[14] 陈素平.配偶淋巴细胞免疫治疗复发性流产34例的护理体会[J].中国医学创新，2012，5（6）：62-63.
（收稿日期：2014-01-24）
[关键词] 淋巴细胞免疫疗法；复发性流产；封闭抗体；妊娠结局
[中图分类号] R714.1 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2014）08-197-03
Efficacy analysis of lymphocyte immunotherapy in treatment of recurrent miscarriage
WANG Tianhong
Department of Obstetrics and Gynecology,Third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College,Guangzhou510150,China
[Abstract] Objective To investigate the clinical value of lymphocyte active immunotherapy in the clinical treatment of unexplained recurrent miscarriage. Methods Fifty patients with recurrent abortion admitted to our hospital from 2010 to 2012 were selected, randomLy divided into two groups and received non-special treatment and lymphocyte active immunotherapy respectively.Meanwhile,the pregnancy outcomes of the patients with negative and positive blocking antibodies who received active immunotherapy were observed. Results The observation group had lower abortion rate than the control group (P＜0.05).After active immunotherapy, the successful pregnancy rate of the patients with positive blocking antibodies was 88.5% and that of those with negative blocking antibodies was 57.1%,with the positive group significantly higher than the negative group (P＜0.05). Conclusion Lymphocyte active immunotherapy can effectively treat recurrent miscarriage and shows favorable clinical effects.Blocking antibody detection is of positive predictive effect for pregnancy outcomes.
[Key words] Lymphocyte immunotherapy;Recurrent miscarriage;Blocking antibody;Pregnancy outcomes
復发性流产是持续发生两次或以上自然流产，由于病因较为复杂，可能包括解剖、遗传、感染以及内分泌等多方面的原因，而还有将近50%的患者无法明确病因[1]。这一部分无法明确原因的复发性流产成为原因不明复发性流产（unexplained recurrent spontaneous abortion，URSA）[2]。在近年来医学的发展中，生殖免疫学研究不断深入，有观点认为超过40%的不明原因复发性流产与免疫因素有关[3]。而主动免疫疗法是近年来较为常用的复发性流产治疗方案，本研究通过丈夫与男性无关第三个体的淋巴细胞行主动免疫疗法，探讨复发性流产免疫治疗的有效性。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院2010年1月～2012年12月门诊诊治的原因不明复发性流产患者50例，患者均经封闭抗体检测为阴性。患者年龄21～37岁，平均（29.8±3.2）岁；流产次数为2～4次，其中2次流产31例，3次流产12例，4次流产7例。排除生殖系统畸形、染色体异常、感染、内分泌异常、自身抗体阳性以及自身免疫性疾病的原因。所有患者均经系统化检查与病史诊断，确定入选标准为：（1）持续发生2次或2次以上自然流产，不存在死胎或死产的病史；（2）经染色体检查确定夫妇均正常，不存在家族性遗传病史，胚胎染色体的核型为正常；（3）行胰岛素、甲状腺与生殖系统内分泌检查，结果均正常，基础体温测定为双相性；（4）患者不存在生殖系统器质性病变或畸形；（5）抗核抗体、核抗原抗体、狼疮抗凝因子、抗心磷脂抗体等自身抗体检验结果均为正常；（6）行支原体、衣原体以及TORCH检查确定无生殖道感染；（7）丈夫行常规精液检查无异常，夫妇血性均不存在不合，抗体效价＞1∶128；（8）行封闭抗体或为阴性[4-6]。将患者随机分为两组，观察组患者25例行淋巴细胞主动免疫治疗，对照组25例患者未行特别处理。两组患者一般资料以统计学软件处理，各项指标差异不具有统计学意义（P＞0.05）。观察组患者均在淋巴细胞主动免疫治疗2周后再次检测封闭抗体，根据封闭抗体检测结果进行分组，治疗后转阳性的15例患者为阳性组，治疗后封闭抗体检测结果仍未阴性的35例患者为阴性组，对比两组患者的妊娠结局。
1.2 供血者筛查与封闭抗体检测
在行淋巴细胞主动免疫治疗之前，供血者均行肝肾功能、血常规、肝炎病毒检验（乙肝两对半、丙肝病毒抗体、丁肝病毒抗原与抗体、戊肝病毒抗体）、梅毒筛查以及AIDS全套病毒抗体筛查，排除通过血液传染疾病的可能性。同时与患者进行知情沟通，让患者了解免疫治疗可能存在的风险，所有患者或家属均签署知情同意书。如果配偶血源筛查不合格，则选择无关第三个体的血缘。
封闭抗体检测方法为流式细胞术，采集患者配偶外周抗凝全血100μL加入鼠抗人CD3、CD4、CD8单克隆抗体20μL，再加入患者血清或正常男性AB型血清50μL，孵育30min，加入红细胞溶解液3mL，PBS洗涤1次，以流式细胞仪客观分析。打印出加女性血清及加AB型血清的配偶T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+细胞比例，并按下列公式计算封闭效率。封闭效率=加AB型血清CD比例-加女性血清CD比例（%）。封闭抗体阳性值：正常生育者封闭效率（X-1.96s），大于此值者为封闭抗体阳性。
1.3 治疗方法
抽取患者配偶的30mL静脉血液，进行2%的肝素抗凝处理，放置在保存淋巴细胞分离液（淋巴细胞分离液的比重为1.020）的离心试管中，确保淋巴细胞分离液与抗凝处理后的血液之间界面的清晰。将试管以每分钟250转的速度离心处理25min，取出淋巴细胞层，以磷酸盐缓冲液清洗2次后，职称篱笆细胞混悬液，将细胞浓度调整为（20～40）×106/mL，以0.5～0.8mL淋巴细胞混悬液在患者两侧前臂皮下注射，注射点4～6个。每两次治疗中间间隔时间为3～4周，以3次为1个疗程。在完成1疗程的治疗后，鼓励患者在12周内受孕，在未确定妊娠之前，每隔5～6周行淋巴细胞主动免疫治疗1次。在确定患者妊娠后，每隔3周行淋巴细胞主动免疫治疗1次，持续到患者妊娠第20周。妊娠超过12周，经B型超声检查不存在异常，且无分娩活婴作为妊娠成功。
1.4 统计学方法
本组数据采用SPSS15.0软件包进行处理，计数资料比较采用x2检验，计量资料采用（）表示，组间比较进行t检验，均以P＜0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 临床疗效比较
两组患者治疗后的临床疗效比较，见表1。观察组患者流产率相比对照组明显降低（x2=9.281，P＜0.05）。
表1 两组患者治疗后的临床疗效比较[n（%）]
组别 n 分娩 流产
观察组 25 19（76.0） 6（24.0）
对照组 25 10（40.0） 15（60.0）
2.2 主动免疫疗法封闭抗体检验不同结果的妊娠结局
淋巴细胞主动免疫治疗后封闭抗体阳性与阴性的妊娠结局统计结果见表2。淋巴细胞主动免疫治疗后，封闭抗体阳性患者共18例，妊娠成功率为88.9%，封闭抗体阴性7例，妊娠成功率为57.1%。封闭抗体阳性的患者妊娠成功率显著高于阴性患者（x2=6.288，P＜0.05）。
表2 淋巴细胞主动免疫治疗后封闭抗体阳性与阴性的妊娠结局统计[n（%）]
组别 n 再次流产 妊娠成功
阳性组 18 2（32.0） 16（88.5）
阴性组 7 3（24.0） 4（57.1）
2.3 不良反应
所有患者均在主动免疫治疗后留院观察30min以上，确定不存在明显的不良反应。在治疗结束后4例患者存在局部皮肤的短期色素沉淀，无硬结存留。
3 讨论
1981年，貝尔和泰勒大胆地采用丈夫和无关第三个体的淋巴细胞进行主动免疫治疗，结果接受治疗的4名孕妇有3名妊娠成功，生下了健康的婴儿。由张世训教授领衔的山东省血液中心于1987年率先开展了这方面的临床研究。到目前为止，先后治疗210例孕妇，妊娠成功率高达87.5%。在现代免疫学的研究中，人类胚胎的形成中来自于父亲的基因抗原被视作外来侵入者，因此在母体中会产生排异反应[7]。在正常的妊娠孕妇体内，会自行产生封闭抗体，对抗自然排异性，保存胚胎的发育生长。而当母体内缺乏封闭抗体时，胚胎会受到母体自然排异的影响从而无法正常生长发育。淋巴细胞主动免疫治疗能够通过配偶的淋巴细胞移植入患者体内，刺激患者的免疫系统，从而激发患者体内封闭抗体的产生[8]。在患者再次妊娠时，已产生的封闭抗体能够通过同源抗原的识别，进行结合，确保封闭抗体效果的作用，保护胚胎的正常生长发育[9]。
本次临床研究中淋巴细胞主动免疫治疗能够有效提高妊娠成功率，从无特别处理的52%提高至84%，与相关文献报道结果一致[10-12]。同时，封闭抗体均为阴性的患者在经过主动免疫治疗后，阳性患者达到18例，而封闭抗体阳性患者的妊娠成功率相比封闭抗体阴性患者明显提高。证明通过淋巴细胞主动免疫治疗能够有效促进患者体内封闭抗体的产生，提高胚胎的成活率。而封闭抗体为阴性的患者由于体内封闭抗体未得到有效的增加，从而提高了再次流产的可能性，证明了封闭抗体对于复发性流产有明显的预测效果[13-14]。
综上所述，淋巴细胞主动免疫疗法对封闭抗体阴性的复发性流产有明显的治疗效果，能够有效促进封闭抗体的分泌，提高再次妊娠的成功率，而封闭抗体检测能够对妊娠结局预测有明显的作用。
[参考文献]
[1] 刘长明.免疫型复发性流产的发病机制与治疗[J].国际妇产科学杂志，2011，38（5）：398-401，406.
[2] 赵芳芳，蒋晓莉，郭谊，等.复发性流产与自身免疫性抗体的相关性研究[J].中国医药，2013，8（11）：1619-1620.
[3] 朱庆文，施蔚虹.复发性流产的遗传因素与同种免疫因素分析[J].中国计划生育学杂志，2013，21（3）：185-187，191.
[4] 肖青，秦爽，龚桂芳，等.淋巴细胞主动免疫治疗同种免疫型复发性流产24例临床分析[J].广州医药，2013，44（5）：42-44.
[5] 沈伶，卢焕霞，胡瑞霞，等.两种免疫治疗方法治疗封闭抗体阴性复发性流产患者的疗效观察[J].新医学，2011，42（6）：402-405.
[6] 秦卫兵，崔蓉，杨宁，等.脐血CD4+CD45+调节性T细胞体外扩增及其抑制复发性流产患者免疫细胞功能研究[J].中国免疫学杂志，2011，27（7）：625-629.
[7] 黄琳，陈建明，黄丽娟，等.复发性流产淋巴细胞免疫治疗前后再次妊娠保胎的临床观察[J].吉林医学，2012，33（5）：927-928.
[8] 田葱，李娟，攸毅，等.3种疗法用于不明原因复发性流产的临床对比研究[J].现代中西医结合杂志，2012，21（14）：1487-1489.
[9] 吴彤华，朱元昌，尹彪，等.不明原因复发性流产与HLA-DQ相关性的初步研究[J].中国免疫学杂志，2013，29（9）：955-959.
[10] 崔艳萍，钟小烨，班清媚，等.淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产的疗效研究[J].现代预防医学，2011，38（9）：1626-1627.
[11] 杨素娟，赵志明，郝桂敏，等.原因不明复发性流产患者免疫治疗前后血清中趋化因子水平变化[J].河北医科大学学报，2013，34（6）：649-652.
[12] 王海燕，吴晓云，李晓荣，等.原因不明性复发性流产淋巴细胞免疫治疗的剂量及疗效研究[J].浙江医学，2013（20）：1813-1815.
[13] 戴云先.淋巴细胞免疫治疗与复发性流产研究[J].中外医学研究，2013，11（3）：27-28.
[14] 陈素平.配偶淋巴细胞免疫治疗复发性流产34例的护理体会[J].中国医学创新，2012，5（6）：62-63.
（收稿日期：2014-01-24）