Real-time PCR与常规PCR在Q热立克体检测中的比较

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目的 比较与评价Real-time PCR与常规PCR,寻求适合于Q热患者早期诊断的方法.方法 应用TaqMan 探针定量PCR、SYBR Green染料定量PCR、巢式PCR和普通PCR四种方法分别对T-A克隆的Q热立克次体基因htpAB片断进行灵敏性、特异性和重复性检测及评价.结果 TaqMan PCR方法的灵敏度分别为SYBR Green PCR、巢式PCR和普通PCR的10倍、10倍和100倍.重复性测试TaqMan法Ct变异系数CV:0.2%~3.0%,SYBR Green法的CV:0.3%~6.0%.TaqMan和SYBR Green PCR均耗时约1h,巢式PCR耗时约2.5h,普通PCR耗时约1.5h.四种方法检测25种相关病原菌结果均为阴性.结论 TaqMan探针定量PCR方法具有很好的特异性、灵敏性、重复性和可操作性,可用于Q热患者临床早期诊断.
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