【摘 要】
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目的利用非基因整合方法建立无精症患者的诱导多能干细胞系(iPSCs)。方法采用目前商品化的无血清完全培养基(TeSR?2)和胚胎干细胞培养基(Stem Adhere? Defined Matrix)限定培
【机 构】
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广州医科大学附属第三医院、广东省产科重大疾病重点实验室
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目的利用非基因整合方法建立无精症患者的诱导多能干细胞系(iPSCs)。方法采用目前商品化的无血清完全培养基(TeSR?2)和胚胎干细胞培养基(Stem Adhere? Defined Matrix)限定培养体系,利用非基因整合的仙台病毒感染无精症患者外周血单个核细胞,建立了无精症患者的i PSCs系,应用免疫荧光、核型分析、拟胚体和畸胎瘤实验对iPSCs系的多能性、核型及分化能力进行鉴定。结果建立的iPSCs系具有人胚胎干细胞的特征。免疫荧光显示,干细胞多能性标志基因表达的八聚体结合转录因子4(OCT4)、性别决定基因相关蛋白2(SOX2)以及干细胞特异表面抗原阶段特异性胚胎抗原-4(SSEA-4)、肿瘤排斥抗原-1-60(TRA-1-60)均阳性;核型分析显示其具有正常的核型;拟胚体和畸胎瘤实验显示其在体外和体内具有向3个胚层分化的能力。结论利用非基因整合方法成功构建了无精症患者的诱导多能干细胞系。
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