【摘 要】
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目的 利用骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)基因构建双基因质粒,转染鼠骨髓间充质干细胞,通过基因表达,促进成骨、成血管能力.方法 构建BMP-2、VEGF基因及双
【机 构】
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吉林大学中日联谊医院麻醉科,长春,130033吉林大学中日联谊医院神经外一科,长春,130033;吉林大学中日联谊医院骨科,长春,130033;
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目的 利用骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)基因构建双基因质粒,转染鼠骨髓间充质干细胞,通过基因表达,促进成骨、成血管能力.方法 构建BMP-2、VEGF基因及双基因质粒,分离培养鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),进行质粒转染,在激发波长488 nm、发射波长507 nm荧光显微镜下观察并计算转染率,分别于1、4、7、10、15、21 d采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测转染了各组质粒的BMSCs培养液中BMP-2、VEGF蛋白的表达.结果 转染结果显示,BMP-2组为38.2％,VEGF组为40.1％、双基因质粒组为37.2％.结果显示各组均有目的蛋白的分泌,BMSCs及空载体组在BMP-2、VEGF的表达上差异无统计学意义(P＞0.05),其余各组释放量比较差异有统计学意义(P＜0.05),双基因质粒组的两种蛋白分泌量大于其他各组.结论 双基因质粒的表达可以互相促进,起到级联放大作用.
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